用光谱法研究奥硝唑与人血清白蛋白的相互作用.pdf

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1、第24卷第4期化学研究中国科技核心期刊2013年7月CHEMICALRESEARCHhxyj@henu．edu．cn用光谱法研究奥硝唑与人血清白蛋白的相互作用霍彩霞，何丽君，赵国虎，常国华，张鸣，魏(兰州城市学院化学与环境科学学院，甘肃兰州730070)摘要：采用荧光光谱法和紫外可见吸收光谱法研究了奥硝唑与人血清白蛋白之间的相互作用；求得了二者在不同温度下的结合常数K和结合位点数，以及对应温度下结合反应的热力学参数，同时采用同步荧光分析技术探讨了蛋白质与药物结合时构象的变化．结果表明，在生理条件下奥

2、硝唑对人血清白蛋白的荧光猝灭主要为静态猝灭；奥硝唑与人血清白蛋白主要靠静电作用力结合．关键词：奥硝唑；人血清白蛋白；相互作用；荧光光谱法；紫外可见吸收光谱法中图分类号：O657．3文献标志码：A文章编号：1008—1011(2013)04—0399—04SpectroscopicstudyoninteractionbetweenornidazoleandhumanserumalbuminHUOCai—xia，HELi—jun，ZHAOGuo—hu，CHANGGuo—hua，ZHANGMing，WEI

3、Yan(SchoolofChemistryandEnvironmentScience，LanzhouCityUniversity，Lanzhou730070，Gansu，China)Abstract：Theinteractionbetweenornidazoleandhumanserumalbumin(HSA)wasstudiedby燕meansoffluorescentspectrometryandultraviolet—visiblelightabsorptionspectrometry．The

4、bindingconstants，numberofbindingsitesandthermodynamicparametersforornidazoleandHSAwereobtained．Inthemeantime，synchronousfluorescentspectrometrywasappliedtostudytheconfigurationchangeofHSAaftercombinationwithornidazole．Itwasfoundthatornidazolequenchedth

5、efluorescenceofHSAthroughastaticquenchingprocess．Theinterac—tionbetweenornidazoleandHSAwasmainlydrivenbyelectrostaticforces．Keywords：ornidazole；humanserumalbumin；interaction；fluorescentspectrometry；UV—Visspectrometry奥硝唑(Ornidazole，ONE[1一(3一氯一2羟丙基)一2一甲基

6、一5一硝基咪唑])是继甲硝唑、替硝唑后第三代硝基咪唑类的高效抗厌氧菌及抗原虫药物，其疗效高，不良反应小，疗程短，体内分布广，应用范围宽．目前对于奥硝唑含量的测定及机理研究的文献较多，有色谱法口]、光谱法_2]、电化学法等r3]，而血清白蛋白与药物相互作用的研究一直是人们关注的科研课题[4]．本文作者运用荧光光谱法和紫外可见光谱法研究了生理条件下奥硝唑与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用，探讨了奥硝唑对HSA的荧光猝灭机理，得到了二者间的结合常数、结合位点数及热力学参数，推断出其结合作用力，并用同步

7、荧光光谱法研究了ONE对HSA构象的影响．1实验部分1．1仪器与试剂RF一5301PC型荧光分光光度计(日本岛津)；uV一2550型紫外一可见分光光度计(日本岛津)；pHS一3C型酸度计(上海雷磁仪器厂)；HH一2型恒温水浴锅．收稿日期：2013—02—04．基金项目：甘肃省城市发展研究院资助项目(2012GSCFY—KJ04)．作者简介：霍彩霞(1973一)，女，副教授，主要从事分析化学研究．E—mail：hcxpl@163．corn．4OO化学研究人血清白蛋白(HSA，美国Sigma公司，分子量

8、为68000)5．0×10mol·L储备液和奥硝唑溶液(西安万隆制药有限责任公司)都置于4℃冰箱冷藏；pH一7．4O的Tris—HC1缓冲溶液(内含0．1mol·LNaC1溶液)，三羟甲基氨基甲烷(Tris)、NaC1和盐酸均为分析纯．实验用水为超纯水．1．2实验方法1．2．1荧光光谱的测定在1cm石英比色皿中，依次准确移取2．50mLTris—HC1缓冲液、0．50mLHSA溶液，然后用可调式微量移液器逐次加入一定体积的的奥硝唑溶液，搅匀，静置10min．固定一28