细胞培养基及其配制方法.doc

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1、DMEM(A)细胞培养基（粉末型）成分序号化合物名称含量(mg/L)序号化合物名称含量(mg/L)1无水氯化钙.2H2O265.0018L-丝氨酸42.002硝酸铁.9H2O0.1019L-苏氨酸95.003氯化钾400.0020L-色氨酸16.004无水硫酸镁97.6721L-酪氨酸72.005氯化钠6400.0022L-缬氨酸94.006无水磷酸二氢钠109.0023D-泛酸钙4.007丁二酸75.0024酒石酸胆碱7.208丁二酸钠100.0025叶酸4.009L-盐酸精氨酸84.0026肌醇7

2、.2010L-盐酸胱氨酸63.0027烟酰胺4.0011甘氨酸30.0028核黄素0.4012L-盐酸组氨酸42.0029盐酸硫胺4.0013L-异亮氨酸105.0030盐酸吡哆辛4.0014L-亮氨酸105.0031葡萄糖1000.0015L-盐酸赖氨酸146.0032丙酮酸钠110.0016L-甲硫氨酸30.0033酚红9.30.0017L-苯丙氨酸66.00DMEM(H)细胞培养基（粉末型）成分序号化合物名称含量(mg/L)序号化合物名称含量(mg/L)1无水氯化钙200.0017L-丝氨酸42

3、.002硝酸铁.9H2O0.1018L-苏氨酸95.003氯化钾400.0019L-色氨酸16.004无水硫酸镁97.6720L-酪氨酸钠盐104.005氯化钠6400.0021L-缬氨酸94.006无水磷酸二氢钠125.0022D-泛酸钙4.007L-盐酸精氨酸84.0023氯化胆碱4.008L-盐酸胱氨酸63.0024叶酸4.009L-谷氨酰胺584.0025肌醇7.2010甘氨酸30.0026烟酰胺4.0011L-盐酸组氨酸42.0027核黄素0.4012L-异亮氨酸105.0028盐酸硫胺4.

4、0013L-亮氨酸105.0029盐酸吡哆辛4.0014L-盐酸赖氨酸146.0030葡萄糖4500.0015L-甲硫氨酸30.0031丙酮酸钠110.0016L-苯丙氨酸66.0032酚红15.00DMEM(L)细胞培养基（粉末型）成分序号化合物名称含量(mg/L)序号化合物名称含量(mg/L)1无水氯化钙200.0017L-丝氨酸42.002硝酸铁.9H2O0.1018L-苏氨酸95.003氯化钾400.0019L-色氨酸16.004无水硫酸镁97.6720L-酪氨酸钠盐104.005氯化钠640

5、0.0021L-缬氨酸94.006无水磷酸二氢钠125.0022D-泛酸钙4.007L-盐酸精氨酸84.0023氯化胆碱4.008L-盐酸胱氨酸63.0024叶酸4.009L-谷氨酰胺584.0025肌醇7.2010甘氨酸30.0026烟酰胺4.0011L-盐酸组氨酸42.0027核黄素0.4012L-异亮氨酸105.0028盐酸硫胺4.0013L-亮氨酸105.0029盐酸吡哆辛4.0014L-盐酸赖氨酸146.0030葡萄糖1000.0015L-甲硫氨酸30.0031丙酮酸钠110.0016L-苯

6、丙氨酸66.0032酚红15.00【DMEM专题】DMEM细胞培养基（二）配制方法及注意事项配制方法：（1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5％的双蒸水。（2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基，轻轻搅拌，不要加热。（3）水洗包装袋的内部，转移全部的痕量干粉到容器内。（4）加NaHCO3到培养基中。（5）用双蒸水稀释到想要的体积，搅拌溶解。注意不要过分搅拌。（6）通过缓慢搅拌加入1NNaOH或1NHCL调节pH值，由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3，因而调节pH值使

7、它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。●所用器皿应严格消毒。●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培

8、养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。谷