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1、巨噬细胞巨噬细胞（英语：Macrophages,缩写为m0）是一种位于组织内的白血球,源H单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓屮的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。基本简介刺激巨噬细胞做它该做的清道夫工作，即可清除老鼠大脑屮的脑斑。脑斑是蛋白质的堆积物,是老年失智症的病征之一。巨噬细胞是扮演清道夫角色的免疫细胞,巨噬细胞中的合成物转
2、型生长因子0（TGF-beta）,具有抑制巨噬细胞活动的功能，以免产生失控反应。老年失智症的大脑，均有转型生长因子P浓度升高的现象。科学家认为转型生长因子B浓度偏高，是因老年失智症的脑斑会引起发炎，而转型生长因子P增加，是为减轻发炎，但新的实验结果显示，情况并非如此。主要特点科学家以基因改造的方式,让老鼠的转型生长因子无法对在外周循环屮的巨噬细胞发出讯号。科学家发现，如此做后，外周循环的巨噬细胞会大举进入老年失智症老鼠的大脑
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4、»O康乃狄克州耶鲁大学医学院陶恩说，外周循环巨噬细胞渗透大脑的动作，即是老年失智症老鼠的疗方。这项结果大出陶恩意料。Z
5、前科学家的论点是,提高大脑的免疫反应可能加重发炎，因而对病情有害。实验屮，基改老鼠的脑斑有九成消失无踪，而且老鼠的官能反应也获得改善，例如走迷宫不再那么容易迷失方向。陶恩说，若科学家能以药物，封阻人体外周循环屮的转型生长因子卩，应该也能达到动员外周巨噬细胞进入人脑，清除老人斑的H的。陶恩的研究团队己将研究重心，改为寻找可封阻转型生长因子B的药物。分子机制巨噬细胞（Macrophages）能够吞没、破坏受损伤组织，有助于启动康复过程。虽然它们在损伤位点发挥关键作用，但一旦任务完成，就需要尽快撤离,结束炎症反应,为再生过程开路。继续存在的巨噬细胞不
6、利于组织恢复。尽管研究人员对于启动巨噬细胞的分子机制研究的比较透彻，但关于其退出损伤位点的过程还了解甚少。研究人员鉴别出一清除外周神经损伤位点巨噬细胞的关键环节，对弄清脊髓损伤、屮风和多发性硬化屮相似的分子机制提供了重要线索。已知Nogo细胞受体家族与神经细胞生长有关，SamuelDavid等观测Nogo家族成员NgRl的作用。NeRI类受体是位于细胞膜上的蛋白开关,受到特异化学信号或配体刺激后，诱导细胞反应。破坏大鼠、小鼠的大腿坐骨神经，观察NgRl在修复过程屮的作用，结果发现巨噬细胞到达损伤位点后，细胞表面会表达NgRk进-•步研究发现，受
7、损神经合成髓磷脂吋，NgRl不仅阻止巨噬细胞与髓磷脂结合，而且直接排斥止在形成过程屮的髓磷脂，若抑制髓磷脂再牛，巨噬细胞会停留在损伤位点周围。最终,研究人员在髓磷脂上鉴别出特异激发排斥反应的分子。可应用于外周神经以外的神经（屮枢神经）,他们发现"风、多发性硬化和脊髓损伤过程屮激活的巨噬细胞，表面都会表达NgRU培养方法巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338DKS774A.kRAW309Cr.1等，均获恶性，培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能，易于传代和瓶壁分离，但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞，以小鼠腹腔取材法最
8、为实用，其法如下：1、实验前三天，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫疑乙酸肉汤lml（勿注入肠内）。2、引颈杀死动物，手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精屮3〜5秒。3、置动物于解剖台上，用针头固定四肢，双手持银撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜，但勿伤及腹膜壁。4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸lOmlEagle液注入腹腔屮,同吋从两侧用手指揉压腹膜壁，令液体在腹腔内充分流动。5、用针头轻轻挑起腹壁，使动物体微倾向一侧，使腹腔屮液休集于针头下吸取入针管内。6、小心拔出针头,把液体注入离心管中,250g4°C离心10分钟，去上清，加10mlEagle培养基。
9、7、计数细胞，每只小鼠可产生20〜30X105细胞，其屮90%为巨噬细胞。8、为获取3X105帖附细胞/平方厘米，需接种2.5X106/mlo9、为纯化培养细胞，去除其它白细胞,接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1〜2次后，再加新Eagle培养液置37°CC02温箱中培养。培养环境细胞培养是无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁，空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养
10、于一室，血洗刷消毒在另一室。常用设施及设备(1)超净工作台：也称净化工作台，侧流式，直流式和外流式三大类。(2)无菌操作间：一般由衣间，缓冲间和操作间
