肌钙蛋白Ⅰ的检测方法及研究进展.pdf

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1、万方数据肌钙蛋白I的检测方法及研究进展李玉芹1，李会强2(1．天津医学高等专科学校，天津300222；2．天津医科大学，天津300203)·23l·摘要心肌肌钙蛋白I(cTnI)具有高度的心肌特异性，作为心肌损伤标志物，已被临床广泛接受，不仅成为诊断急性心肌梗死的“金标准”，而且已成为心肌疾病病情监测、疗效观察及预后评估的最合适标志物。血清c’rnJ水平定量方法较多，检测性能差异较大，本文就eTnI实验室检测方法的研究进展作一综述。关键词心肌损伤：心肌肌钙蛋白I(cTnI)；检测方法[中图分类号]R542．2[文献标识码】A学科分

2、类代码：32024文章编码：100l一8131(2013)03—0231—02ProgressonDetectionMethodsofITroponinLIYuqinl，LIHuiqiangz(1．MedicalUniversityofTianjin，Tianjin300203，China；2．Ti肌jinMedicalCollege，Ti蛐jin300222，China)AbstractCardiactmponinI(cTnl)withahighdegreeofcardiac—specific，asmarkersofmyocar

3、dialinjury，hasbeenwidelyac-ceptedonclinic，notonlybecomethe“goldstandard”ofdiagnosisofacutemyocardialinfarction，andhasbecomethemostappropriatemarkerinmyocardialdiseasemonitoring，curativeeffectobservationandprognosticevaluation．Thelevelquantitativemethodofsel'umcTnIismo

4、reandthedetectionperformancedifferences．AnoverviewoftheresearchprogressincTnIlaboratorydetectionmethodsisprovided．KeywordsMyocardialinjury；CardiactroponinI(cTnI)；Detectionmethod心肌肌钙蛋白(cardiactropnin，Tn)是1987年Cummins等诊断急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction，AMI)时首次报道的。肌钙蛋白(T

5、roponin，Tn)是心肌的主要结构收缩蛋白，由三个亚单位组成：肌钙蛋白c(TnC)、肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白1(TnI)。其中TnI又分为3种亚型：快骨骼肌亚型(frIlI)、慢骨骼肌亚型(sTnI)和心肌亚型(cTnI)，但个体出生9个月后，心肌中仅存cTIII。cTnI无任何亚型，其分子量24kDa，由209个氨基酸组成，有超过40％的氨基酸序列与其他亚型有异源性，且氨基端多延伸出一段32个氨基酸组成的序列；所以eTnI具有高度的心肌组织特异性，已被临床广泛接受，不仅成为诊断急性心肌梗死的“金标准”⋯，而且已成为心肌

6、疾病病情监测、疗效观察及预后评估的最合适标志物旧。3J。血清cTnI水平定量方法较多，检测性能差异较大，本文就cTnI的实验室检测方法综述如下。l酶联免疫吸附试验法酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)法Ho已成为一种经典的、被广泛应用于临床的免疫测定技术。该方法将待测血清与辣根过氧化酶(Horseradishperoxidase，HRP)标记的特异性克隆抗体进行混合，然后对混合液进行孵育。再向己包被cTnI的微孔板中加入孵育好的混合液。由于微孔板之前包被的cTnI与待检血清中

7、的cTnI共同竞争单抗，使得微孔板上的HRP被间接固定住，从而可通过测定被间接固定在微孔板中HRP的催化活性，与标准曲线对照计算得到待测血清中cTIII的浓度。其检测低限可到达0．1—0．2彬L，30min内完成试验。目前，ELISA法检测cTnI已成为较为成熟的常规方法，适合于批量标本检测；但这种方法影响因素较多，存在分离和洗涤步骤繁琐、测定周期偏长等问题，限制了其应用。2化学发光法‘51一类测定cTnI的化学发光系统多采用酶促化学发光双抗体一步夹心酶免疫分析法，以ALP作为标记物，用单克隆抗cTnIIsG抗体包被的磁性微粒为固

8、相载体，检测时样品中的cTnI与包被在固相载体上的抗体及ALP标记的抗体形成夹心复合物，加人发光基质底物，测定其发光强度，通过多点定标曲线计算cTnI浓度。最具代表性的是美国BeckmanCotllter公司的Access微粒子化学发光免疫分析系统