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《根霉与米曲霉原生质体一次基因组改组后代酶活力和发酵酒酿特性研究【开题报告+文献综述+毕业论文】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物工程根霉与米曲酶原生质体一次基因改组后代酶活力发酵酒酿特性研究1.课题研究意义及国内外研究现状酒酿是中国的传统食品,其富含糖类、蛋白质等,是深受大众喜爱的食品之一。近年来,随着生物技术的发展,传统食品的研究也在不断的深入中。利用新的技术去改良和鉴定旧的生产工艺,使之不断的完善和精确,以达到使产品的产量增加,使产品的口味、色泽、香气等多方面的提高,也能使产品中的有害物质尽可能的降低。除此之外,新的技术还能更精确的控制产品的生产过程,从而达到生产者的目的。微生物原生质体融合可以使后代继承两个亲本的特性,而经过培养后,不同代数的
2、后代也会产生相应的区别,通过后代的变化规律可以更好进行产品生产工艺的调整。米曲酶和根霉是发酵酒酿中主要的微生物,两种微生物的融合后代制得的曲种可以利用糖化酶活力、蛋白酶活力,以得到不同后代的活力。酒酿的发酵是通过微生物(根霉、米曲霉等)将糊化后的淀粉糖化,蛋白质水解成氨基酸,并使糖化产物通过糖酵解途径转变成酒精。通过米曲酶(亲本)原生质体和根霉(亲本)原生质体灭活后融合,并培养至一定代数后进行发酵酒酿。融合后代发酵所得的产品进行酒精度、糖度、酸度等的测定,得出的结果与亲本(酵母、米曲酶)发酵酒酿的产品所得结果进行比较,以得出融合后代的发酵酒酿
3、特性和稳定性等遗传特性和变化规律。2.课题研究的主要内容、预期目标和研究方案主要内容:1培养基的制备,灭菌,菌种的接种、扩大培养2制备曲种,测定蛋白酶活力、糖化酶活力3酒酿发酵4酒酿中乙醇含量、甲醇含量、糖度、酸度和香味物质的测定预期目标:36获得产品,通过产品测定出的数据得出融合后代的发酵酒酿特性和稳定性等遗传特性和变化规律研究方案:1菌种的扩大培养将准备好的菌种在无菌超净工作台上接种于马铃薯固体培养基上,28~30℃下培养48h。2曲种的制备与数据测定2.1用煮好的米饭,平均分装到培养瓶中,放入高压灭菌锅内在121℃条件下灭菌40min,
4、排气、降温取出,趁热马上将瓶内米饭培养基抖散,冷至30℃左右,在无菌超净工作台进行接种。培养箱28℃下培养3d后,取出风干称重。2.2将制备好的曲种取出若干,以酪蛋白为底物利用福林酚法测定蛋白酶活力,以淀粉为底物利用碘量法测定糖化酶活力。3酒酿发酵大米→清理→浸泡→清洗→蒸饭→灭菌→冷却→接种→固体培养4各项数据测定乙醇含量使用指示剂法测定,甲醇含量使用品红-亚硫酸法测定,糖度使用斐林法测定,酸度使用滴定法测定,蛋白含量使用福林酚法测定,并取酒糟通过质谱仪测定风味物质。3.课题进度计划2010年11月-2011年12月实验资料的收集和实验资料
5、归纳2011年12月-2011年1月实验方案的制定和实验前准备2011年1月-2011年2月曲种的制备及其数据测定2011年2月-2011年3月酒酿的制备及其数据测定4.参考文献[1]HopwoodDA,WrightHM.GeneticrecombinationthroughprotoplastfusioninStreptomyces[J].JGenMicrobiol,1979,111(1):137-143[2]彭帮柱,岳田利,袁亚宏等.酵母菌原生质体融合技术[J].西北农业学报,2004,13(1):101-103.[3]王燕.热-紫外灭活
6、双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究[J].中国酿造,2008,19:42-44.[4]李立风,潘力,彭昶等.基因组改组:几株同源酱油曲霉的多亲株电融合育种[J].中国调味品,2007,7:14-18.[5]粱平彦,刘宏迪,展青霉和产黄青霉的种间体细胞杂交[J].微生物学报,1982,22(3):248—256.[6]芦志龙,吴冰,袁尔东等.基因组改组技术及其在微生物育种中的应用研究进展[J]36生物技术通报2008增刊[7]王国良,对小猿叶甲高毒力烟曲霉菌株的选育技术[J]中国生物防治,2008,24(2):182-18536毕业论文文献
7、综述生物工程根霉与米曲霉原生质体一次基因改组后代酶活力和发酵产物特性研究摘要:基因组改组是通过一种或多种传统诱变方法处理菌株,从中得到若干性状微量提升的变异子(即出发菌株),再对这些变异子进行多次的“递归式原生质体融合”即每次将具有性状提升的后代继续进行随机原生质体融合,使其基因组充分重排。最后利用高通量筛选技术得到同时具有多种出发菌种有利性状,且生产水平大幅度提升的变异菌株。这项技术实质上是利用了新的原生质体融合策略对出发菌株进行了基因组水平的改造,从而达到定向进化的目的。原生质体广泛的应用于食品、制药、农业等领域,本文简略介绍了原生质体的
8、制备、融合、再生及筛选的过程中的方法和影响因素,以及后代中关于发酵酒酿特性方面相关研究所需的方法简介。关键词:基因改组、原生质体、融合、发酵酒酿酒酿是中国的传统食品