根霉与酵母原生质体一次基因改组后代酶活力和发酵产物特性研究【开题报告+文献综述+毕业论文】

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1、本科毕业论文系列开题报告生物技术根霉与酵母原生质体一次基因改组后代酶活力和发酵产物特性研究1.课题研究意义及国内外研究现状原生质体融合技术起源于20世纪60年代。1960年法国的Karski研究小组在两种不同类型的动物细胞混合培养中发现了自发融合现象。同时,日本的Okada发现并证明了仙台病毒可诱发内艾氏腹水癌细胞彼此融合,从而开始了细胞融合的探讨。菌种原生质体融合是一种非常有用的技术来获得优良的菌种个体。在很多方面都起着很大的作用，比如：抗生素高产菌株的选育、多功能菌种的选育、微生物育种方面的应用

2、等。在高产菌株选育中不止是抗生素，还有许多微生物可以产生对人体有帮助的药物，但是这些微生物所产的药物含量很低，所以无法广泛的将药物应用于治疗，如果能选出高产菌株，那对医学界来说是另一个突破，意味着某些现在不能治愈的病都可能得到治愈。还有在抗生素高产菌选育中还有可能获得新的抗生素，可以说是一举两得。随着各种各样的突发的传染病的发生，无时无刻威胁着人类的生命，这时每种有效的药物的诞生都是非常有价值的，所以对微生物原生质体融合选育得到新的药物是国内外都非常关注的项目。我通过对根霉与酵母原生质体一次基因改组

3、后代进行发酵酒酿，分析、得出融合后代的发酵酒酿特性和稳定性等遗传特性和变化规律。二、主要内容与基本要求：通过对根霉与酵母原生质体诱变后的高酶活力菌株，进行一次基因改组，对融合后代的曲种、制曲、发酵酒酿，测定曲种的蛋白酶活力、糖化酶活力，测定酒酿中乙醇含量、甲醇含量、糖度、酸度、蛋白等含量，通过质谱仪测定酒酿中香味物质，同亲本相比，得出融合后代的发酵酒酿特性和稳定性等遗传特性和变化规律3.课题进度计划2010年11月—2010年12月文献检索，收集资料，完成开题报告2010年12月—2011年1月菌种

4、的活化和扩大培养2010年12月—2011年1月后代的培养鉴定，酒酿数据检测2011年3月—2011年4月毕业论文的初稿2011年5月完成毕业论文4、主要参考文献：[1]HopwoodDA,WrightHM.GeneticrecombinationthroughprotoplastfusioninStreptomyces[J].JGenMicrobiol,1979,111(1):137-143.[2]梁平彦,刘宏迪.展青霉和产黄青霉的种间体细胞杂交[J].微生物学报,1982,22(3):248-2

5、56.[3]彭帮柱，岳田利，袁亚宏等.酵母菌原生质体融合技术[J]西北农业学报，2004，13（1）：101-103[4]王燕.热-紫外灭活双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究[J]中国酿造，2008，19：42-44[5]李立风,潘力,彭昶,叶燕锐.基因组改组:几株同源酱油曲霉的多亲株电融合育种[J]中国调味品2007，7：14-18[6]芦志龙，吴冰，袁尔东等.基因组改组技术及其在微生物育种中的应用研究进展[J]生物技术通报2008增刊[7]王国良.对小猿叶甲高毒力烟曲霉菌株的选育技术[J]中

6、国生物防治，2008，24(2)：182-185毕业论文文献综述生物技术酒酿等发酵产物特性研究摘要：本文简略介绍了菌种融合后酒酿中曲种制备的方法和影响因素，以及关于发酵酒酿特性方面相关研究所需方法的简介。关键词：曲种、融合、发酵酒酿1曲种的制备1.1制曲曲种在酒酿发酵发挥着至关重要的作用，以此好的曲种是酿造出好酒酿的关键。在制备曲种时，培养基的杀菌工作显就得十分重要。目前，使用较多的传统杀菌方法，是用高压蒸汽杀菌法，此方法的缺点是杀菌时间长、能耗高、劳动强度大、不能实现连续作业等[1]。1.2曲种的

7、测定曲种的主要作用有3个方面：一是为酒母和发酵醪提供酶源，使饭粒中的淀粉、蛋白质和脂肪等溶出和分解；二是在曲菌繁殖和产酶的同时，产生葡萄糖、氨基酸和维生素等成分，这是酵母的营养来源，并生成有机酸、高级醇及酯类等成分；三是酒曲香及酒曲的其它成分（如丙三醇等）作为前体物质赋予酒酿以独特的风味。糖化酶活力和蛋白酶活力是曲种质量的重要指标，也是造成上述三方面的主要因素[2]。糖化酶活力的高低，是α-1-4葡萄糖苷酶。这类酶作用于淀粉分子末端，从淀粉非还原性末端顺次切开α-1-4糖苷键，生成葡萄糖。蛋白酶活力

8、是指能催化分解蛋白质肽键的一群酶活力的总称，这些酶的共同特点：使蛋白质降解成为小分子的蛋白胨、小分子肽或氨基酸等物质[3]。曲种中蛋白水解酶的活力比较低，但如果缺乏蛋白水解酶，则酒质明显降低。曲种中蛋白水解酶的存在为高级醇的生成提供了先决条件。糟醅中的芽孢杆菌，虽然在蒸馏时被杀灭，但其孢子仍存在于糟醅中，经堆积培养后，芽孢杆菌总数可达相当大的数量。所以曲种中蛋白水解酶的存在，使糟醅中游离氨基酸增加，为芽孢杆菌（己酸菌、丁酸菌）提供足量的氮源，而使其增殖、产酸，有利于酒