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1、高纯度甜茶昔抗疲劳及免疫调节功能探究作者：谢莹，陈全斌，罗达伟，钟正贤【摘要】目的探讨甜茶昔纯品的抗疲劳及免疫调节功能的作用。方法对小鼠连续灌胃不同剂量的粗品和甜茶昔纯品,采用小鼠负重游泳实验，测定小鼠游泳耗竭时间，以及血中乳酸和尿素氮含量；对正常小鼠免疫后测定其溶血素抗体生成和免疫器官重量，采用碳粒廓清法测定单核细胞的吞噬功能。结果粗品和甜茶昔在大、小剂量下可明显延长小鼠游泳耗竭时间，减少血中乳酸和尿素氮含量；增加小鼠胸腺、脾脏等免疫器官重量，提高小鼠血清溶血素水平。提高小鼠单核吞噬细胞的吞噬指数。结论粗品和
2、甜茶昔具有抗疲劳、免疫增强作用。【关键词】甜茶提取物；抗疲劳；免疫调节甜茶RubusSuavissimusS.Lee是蔷薇科悬钩子属的一种灌木。目前人们对甜茶药理研究大部分局限于甜茶粗提物，研究表明甜茶粗提物能降低正常小鼠血糖水平；其对小鼠糖异生具有明显的抑制作用，并具一定的降血脂和抗氧化作用[1],但对甜茶昔纯品的药理研究未见报道。为此本文对高纯度甜茶昔（含甜茶昔98.5%,以下简称甜茶昔）和粗提取物（含甜茶昔40%,以下简称粗品）进行研究，探索其抗疲劳、免疫增强和降血糖作用。1材料与仪器1.1甜茶昔及粗品的
3、制备甜茶昔和粗品的制备按文献［2］进行。1.2动物昆明种小鼠（清洁级），体质量18-22g,雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供（合格证号SCXK桂2003-0003）o小鼠分性别饲养于空调实验室内，室温（22±2）°C,相对湿度（60±2）%,喂颗粒标准饲料，自由饮水和摄食。1.3药物与试剂阳性药百年乐，广西中医学院制药厂产品（批号20070809）o左旋咪哩，桂林制药厂产品（批号20060301）o乳酸试剂盒，南京建成生物工程研究所产品（批号20071023）o尿素氮试剂盒，长春汇力生物技术有限公司产品
4、（批号2007017）o1.4仪器722型光栅分光光度计（上海分析仪器三厂）。2方法2.1小鼠负重游泳实验及乳酸和尿素氮测定［3］取小鼠60只，雌雄各半。随机分为空白对照组，阳性百年乐（5.0g/kg）组，粗品大、小剂量组，甜茶昔大、小剂量组,每组10只。灌胃给药1次/d,连续8d。第8天给药后lh,开始负重游泳实验。给小鼠负重（负重量约为体质量的10%）,放入水温3(rc水槽中游泳，并记录小鼠开始游泳至体力耗尽沉入水面下8s不能浮出水面为止的时间，为体力耗竭时间。并在耗竭游泳实验后的各组小鼠立即从水中取出，让
5、小鼠休息30min后，摘除眼球取血，按临床试剂盒方法测定血液中乳酸和尿素氮的含量。2.2对小鼠溶血素抗体生成的影响［4］取小鼠60只,随机均分为6组。分设空白对照组，阳性药左旋咪口坐(50mg/kg)组，粗品大、小剂量组，甜茶昔大、小剂量组，每组10只。给药各组灌胃给药，S3空白对照组给予同体积蒸镭水。于给药第1天每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.2ml进行免疫，连续给药7d,1次/d。末次给药后40min,摘眼球取血、离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清lml与0.5ml5%鸡红细胞和0.5ml
6、10%新鲜豚鼠血清(1:10)混合，在37。(2恒温箱中保温30min后，置LC冰箱终止反应。离心取上清液，分光光度计540nm处测定其吸光度(A)值。处死小鼠后称体质量，摘出胸腺及脾脏称重,以胸腺或脾脏重量(阳)与体质量(g)之比作为胸腺或脾脏指数。2.3单核巨噬细胞吞噬功能测定采用碳粒廓清法[5]。取小鼠60只，雌雄各半，随机分为空白对照组，左旋咪哇(100mg/kg)组，粗品大、小剂量组，甜茶昔大、小剂量组，每组10只。用药各组小鼠灌胃给药，正常对照组和模型对照组给予等体积蒸馆水，1次/d,连续7d。于末
7、次给药60min后，小鼠尾静脉注射20%印度墨汁0.1ml/10g体重，于注入后的2min和7min时分别从小鼠眼眶静脉丛用微量吸管取血20P1,溶于2ml0.1%Na2C03溶液中，分光光度计上650nm处测定吸光度(OD值)，按公式:K=(logODl-logOD2)/(t2-t1)计算吞噬指数K值。2.4统计学处理数据应用SPSS11.5软件分析，采用完全随机设计的单因素方差分析(one-wayAN0VA),各样本均数间多重比较采用LSD(leastsignificantdifference)t检验。P&
8、lt；0.05时有统计学意义。3结果1.1对小鼠抗疲劳能力的影响阳性药百年乐，粗品大、小剂量组和甜茶昔大剂量组能明显延长小鼠游泳耗竭时间，并降低血乳酸和尿素氮含量，与对照组比较有统计学意义。见表1。表1甜茶提取物对小鼠抗疲劳能力的影响(略)3.2对小鼠溶血素抗体生成的影响阳性药左旋咪13坐，粗品大、小剂量组和甜茶昔大、小剂量组能提高小鼠溶血素抗体生成，并能增加小鼠胸腺指数和脾脏指数，与
