马铃薯多酚氧化酶性质研究

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1、多酚氧化酶是植物中滋见的生物催化剂，曲催化植物中的各种生物化学反应。若以马铃薯为原料提取多酚氧化酶进行分离纯化等研究则需要使用乙醇作为提取剂。通过研究得到马铃薯多酚氧化酶的理化性质，酶作用的最适温度和pH分别是40°C和pH5.80为了了解低浓度下的亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、偏重亚硫酸氢钠、抗坏血酸、半胱氨酸以及谷胱甘肽等试剂对马铃薯多酚氧化酶的影响，将上述试剂按一定浓度加入马铃薯多酚氧化酶中进行试验，结果表明这些试剂都对多酚氧化酶有一定的抑制作用。StudyonthefeatureofthePotatosPolyphenolOxidase

2、LiBozhi(CollegeofLifeSciences,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou,510642,China)Abstract:Polyphenoloxidaseisacommonbiologicalcatalystinplants.AlwaystakepartinmanycatalyticreactionofplantsBiochemicalreaction.Inthiswork,potatowasusedastherawmaterialtopreparePolypheno

3、lOxidasebyethanolSeparationandpurification.TostudiedthephysicalandchemicalpropertiesofPotatosPolyphenolOxidase.WeLearntthatthebesttemperatureandPHforthisenzymeis40°CandpH5.80InordertoknowCys,Glutathione,Vc,SodiumBisulfite,SodiumsulfiteandSodiumsulfitethesereagent"saction

4、forthePotatosPolyphenolOxidase.WeaddthesereagentsatacertainconcentrationinPotatosPolyphenolOxidase.Theresultsshowedthatthesereagentshadacertaininhibitoryeffectonpolyphenoloxidase.Keywords:PhtatoPolyphenolOxidaseinhibitionV.1/-*—2L-.1刖吕1.1多酚氧化酶研究情况11・1・1多酚氧化酶结构与特性41.1.2多酚

5、氧化酶结的定位41.1.3多酚氧化酶在酚类物质中的作用21.1.4多酚氧化酶与褐变21.2马铃薯以及产业概况31・3马铃薯多酚氧化酶的研究意义与研究内容32多酚氧化酶的提取纯化32.1试剂与仪器32.2方法42.2.1马铃薯多酚氧化酶提取与纯化42.2.2酶活性测定53结果3.1马铃薯多酚氧化酶的纯化研究53.1.1低浓度下亚硫酸氢钠对多酚氧化酶催化反应的影响53.1.2亚硫酸钠对多酚氧化酶催化反应的影响63.1.3低浓度下抗坏血酸对多酚氧化酶催化反应的影响73.1.4低浓度下谷胱甘肽对多酚氧化酶催化反应的影响83.1.5低浓度下半胱氨

6、酸对多酚氧化酶催化反应的影响93.1.6低浓度下焦亚硫酸氢钠对多酚氧化酶催化反应的影响10114讨论参考文献14致谢151前言1.1多酚氧化酶研究情况1.1.1多酚氧化酶结构与特性多酚氧化酶（PolyphenolOxidase简称PPO）是一类广泛分布于植物休屮的一种铜结合酶。它是由核基因编码、多基因控制，在细胞质中合成，通过一•定的方式转运至质体内而成为具酶活性的形式，对农产品品质形成有重要影响（代丽等，2007）oPPO是rtl核基因编码，多个基因控制，表现出多基因的家族性。在番茄中有7个编码PPO的核基因（PPOA、A，、B、C、

7、D、E、F）；在马铃薯中，编码PPO的核基因至少有6个，分别为POT32、POT33、POT41、PT72、NOR333、Pl、P2；蚕豆、苹果小至少有四个基因编码PPO；对小麦的PPO进行QTLs定位分析表明，小麦的PPO至少由3个不同的基因编码，控制PPO活性的主效基I大I位于2D染色体上，2A、2B、3B、3D和6B染色体上有一些微效基因等等（代丽，等2007）。具有导肽进入叶绿体的蛋白是要通过翻译后加工，初始合成的前体要比成熟的蛋白长，导肽是负责细胞器外膜的初始识别，对细胞器蛋白的定位有重要意义。现有研究也证明PPO分子由无活性

8、转变为有活性的过程小需要经历肽链加工。（代丽，等2007）。具有保守序列对植物PPO基因的研究过程中无一例外的发现：所研究的植物均含有保守序列・编码铜结合部位的功能区域（代丽，等2007）o不存在内含子长期