DNS法测定木糖含量时最佳测定波长的选择

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1、1962006,Vol.27,No.04食品科学※分析检验DNS法测定木糖含量时最佳测定波长的选择王文岭,黄雪松*(暨南大学理工学院食品科学与工程系,广东广州510632)摘要:为了正确地选择DNS法测定木糖含量时的最佳测定波长,扫描了木糖与DNS试剂反应液的紫外-可见吸收光谱(400~700nm),并分析测定了其在480、500、520、540、550、560nm时的OD值。结果表明:木糖与DNS试剂反应液的最大吸收波长在480~490nm;在480nm波长下测定时,灵敏度最高,且于150~600μg/ml范围内呈现较好的线性关系,其回归系数r值=0.99997

2、,回收率大于99.6%。在500、520、540、550、560nm测定时,灵敏度依次降低。因此,DNS法测定木糖时的最佳测定波长为480nm。关键词:DNS法;木糖;最佳波长IdentificationofOptimumWavelengthAssayedbyDNSMethodforDeterminationofXyloseContentWANGWen-ling,HUANGXue-song*(DepartmentofFoodScienceandTechnology,JinnanUniversity,Guangzhou510632,China)Abstract:Th

3、epaper’saimwastogettheoptimumwavelengthforthedeterminationofxylosecontentbyDNSmethod.ThereactionsolutionofxyloseandDNSregentwasscannedfrom400~700nm,andtheODvaluesweredetermined,respectively.Theresultsshowedthatthemaxabsorptionisfrom480~490nm,andthelinerangeofthemethodis150~600μg/ml(r=

4、0.99997)xyloseat480nm.Theresultalsoshowedthesensitivity,accuracy,precisionarethehighestat480nm,andtherecollectionrateismorethan99.5%.Therefore,theoptimumwavelengthis480nmwhenthexyloseisdeterminedbytheDNSmethod.Keywords:DNSmethod;xylose;optimumwavelength中图分类号:O657.32;TS241文献标识码:A文章编号:1

5、002-6630(2006)04-0196-03自然界植物纤维原料极为丰富,主要有纤维素、讨了木糖含量测定时的最佳波长,为木糖的定量测定及半纤维素和木质素构成,其中,木糖构成纤维素类物其相关研究提供依据。质的第二大单糖成分,含量高达35%以上[1]。木糖及其1材料与方法相关产品(如木聚糖、低聚木糖)具有很高的功能价值,其作为功能性食品添加剂已经被广泛应用到疗效食品、1.1试剂和仪器健美食品等具有保健功效的食品中[2]。因此,木糖含量木糖;3,5-二硝基水杨酸(DNS);S53型紫外-可的测定对木糖及木糖相关行业十分关键,而最佳测定波见分光光度计;MA110型分析天

6、平。长的确定对其准确定量测定起着重要影响。1.2溶液及其配制木糖是一种还原糖。目前,测定还原糖的方法1.2.1DNS试剂有很多,其中,DNS(3,5-二硝基水杨酸)法因其方便、甲溶液:溶解6.9g结晶苯酚于15.2ml10%氢氧化钠快捷而被广泛采用。但是,在利用DNS法测定木糖中,并稀释至69ml,在此溶液中加入6.9g亚硫酸氢钠。的含量时,使用的测定波长没有统一的标准:如480乙溶液:溶解255g酒石酸钾钠于300mll0%氢氧化[3]、490[4]、520[5]、540[7,8]、550nm[9,10]等波长作为测定钠中,再加入880ml(1%)3,5-二硝基

7、水杨酸溶液。波长的均有。这些测定波长的差异,给木糖含量的测将甲溶液与乙溶液相混合即得DNS试剂,贮存于定带来一定的混乱,使得不同实验室之间的测定结果难棕色试剂瓶中,室温下放置7~10d后使用。以相互比较,影响了木糖测定的准确性和统一性。本1.2.2木糖标准溶液文依据试验的灵敏度、精确度、稳定性等指标着重探收稿日期:2005-05-27*通讯作者作者简介:王文岭(1980-),女,硕士研究生,研究方向为功能性食品。※分析检验食品科学2006,Vol.27,No.04197称取预先干燥至恒重的木糖1.0000g,定容至100ml,表1木糖与DNS试剂反应液在不同波长下

8、测定的OD

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