HBsAg分析性能评估

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1、乙型肝炎病毒表面抗原检测试剂（胶体金法）分析性能评估资料本试剂系采用双抗体夹心法和胶体金免疫层析法原理，在硝酸纤维素膜的检测区和控制区分别包被鼠抗-HBsAg单抗和羊抗鼠IgG，在结合垫上含胶体金标记的鼠抗-HBsAg单抗，检测时将样本加至加样区，样本通过结合垫时，溶解包被在结合垫上的胶体金标记的抗-HBsAg抗体，由于毛细效应，沿膜向上移动。如果样本中含有HBsAg，则在检测区形成双抗体夹心复合物出现紫红色条带。如果样本中不含有HBsAg，检测区不出现紫红色条带。无论样本中是否含有HBsAg，胶体金标记的抗-HBsAg抗体在控制区与羊抗鼠IgG结合出现紫红色条带，表明检测结果有

2、效。用于体外定性检测人全血、血清或血浆中的HBsAg。我们参考《中国生物制品规程》，对试剂成品的性能进行了系统的评估，主要涉及灵敏度、特异性、批内和批间精密度等。检测评估所用标本源于进口标准品和临床样本。评估所用试剂为质量合格的规格为40人份/盒的试剂三批（Lot：HBsAg20080501-1，Lot：HBsAg20080503-1，Lot：HBsAg20080505-1），规格为100人份/盒的试剂三批（Lot：HBsAg20080502-2，Lot：HBsAg20080504-2，Lot：HBsAg20080506-2）。1.灵敏度的评估1.1材料和方法1.1.1检测下限标

3、本准备取HBsAg标准品（来自中国药品生物制品检定所），用一份正常人的阴性血清定量溶解稀释到2.5ng/mL的终浓度，作为灵敏度评估指标。1.1.2检测下限确定每批试剂对已准备好的检测下限标本做30次重复测定。30次重复的阳性符合率要求大于99%，确定该批试剂的检测限度，分析不同包装规格的试剂各三批的检测限度，得到试剂的最低检测限度。1.2实验结果及讨论按照试剂使用操作标准程序进行检验。重复30次。同时每次设定1份阴性质控。结果如下（“＋”表示阳性结果，“－”表示阴性结果）：表1-1规格为40人份/盒的试剂的实验结果重复次数标本检测结果（2.5ng/mL）阴性Lot：HBsAg2

4、0080501-1Lot：HBsAg20080503-1Lot：HBsAg20080505-11＋＋＋－2＋＋＋－3＋＋＋－4＋＋＋－5＋＋＋－6＋＋＋－7＋＋＋－8＋＋＋－9＋＋＋－10＋＋＋－11＋＋＋－12＋＋＋－13＋＋＋－14＋＋＋－15＋＋＋－16＋＋＋－17＋＋＋－18＋＋＋－19＋＋＋－20＋＋＋－21＋＋＋－22＋＋＋－23＋＋＋－24＋＋＋－25＋＋＋－26＋＋＋－27＋＋＋－28＋＋＋－29＋＋＋－30＋＋＋－阳性符合率（%）100100100表1-2规格为100人份/盒的试剂的实验结果重复次数标本检测结果（2.5ng/mL）阴性Lot：HBsAg20080

5、502-2Lot：HBsAg20080504-2Lot：HBsAg20080506-21＋＋＋－2＋＋＋－3＋＋＋－4＋＋＋－5＋＋＋－6＋＋＋－7＋＋＋－8＋＋＋－9＋＋＋－10＋＋＋－11＋＋＋－12＋＋＋－13＋＋＋－14＋＋＋－15＋＋＋－16＋＋＋－17＋＋＋－18＋＋＋－19＋＋＋－20＋＋＋－21＋＋＋－22＋＋＋－23＋＋＋－24＋＋＋－25＋＋＋－26＋＋＋－27＋＋＋－28＋＋＋－29＋＋＋－30＋＋＋－阳性符合率（%）100100100根据上面的结果，我们可以看出人血清中HBsAg浓度达到2.5ng/mL的标本能够稳定的检测出阳性结果，阳性符合率合乎要求，能

6、够满足定性的需求，并且不同规格试剂各三批的结果均如此。我们将试剂的最低检测下限规定为2.5ng/mL。1.特异性的评估1.1材料和方法购买临床甲型肝炎病毒样本（来自公司）、丙型肝炎病毒样本（来自公司）、梅毒螺旋体抗体（来自公司）、类风湿因子阳性（来自公司）和红斑狼疮患者的样本（来自公司），以及正常人的阴性血清，作为一套特异性标本，验证试剂的抗干扰能力。按照试剂使用操作标准程序，每个标本重复3次。1.2结果与讨论按照试剂使用操作标准程序进行检验。每个标本重复3次。同时每次设定1份阳性质控。结果如下（“＋”表示阳性结果，“－”表示阴性结果）：表2-1规格为40人份/盒的试剂的实验结果

7、样品名称Lot：HBsAg20080501-1Lot：HBsAg20080503-1Lot：HBsAg20080505-1123123123甲型肝炎病毒－－－－－－－－－丙型肝炎病毒－－－－－－－－－梅毒螺旋体－－－－－－－－－类风湿因子－－－－－－－－－红斑狼疮－－－－－－－－－阴性血清－－－－－－－－－阳性血清+++++++++表2-2规格为100人份/盒的试剂的实验结果样品名称Lot：HBsAg20080501-1Lot：HBsAg20080503-1Lot：HBsAg20