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《《法医学中的酶型》ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、酶型（Isoenzyme)酶型的定义又称同工酶：分子结构不同，但催化同一生化反应的一组酶。酶型的分类多位点基因控制的同工酶：如LDH,PGM。单位点复等位基因控制的同工酶：如EAP，EsD。遗传变异体同工酶：点突变所致。如G6PD。次级同工酶（修饰同工酶）：脱氨、乙酰化等所致。酶的一些特点酶的本质是蛋白质酶促反应的高度专一性：催化特定的底物。酶反应的最适PH酶反应的最适温度酶多为水溶性酶多不耐热电泳检测酶型的基本原理传统电泳：等电点、分子大小。等电聚焦电泳：等电点。影响电泳的因素：电场强度、缓冲
2、液（PH值、离子强度）、胶浓度、电泳时间、产热等。红细胞酸性磷酸酶 （ErythrocyteAcidPhosphatase.EAP)概况EAP（ACP1）、PAP、ACP2EAP是第一个被报道具有多态的酶。单亚基结构，基因定位于2P25，等电点为5-7，酶反应的最适PH为5.5。分型1963年（Hopkinson),Nature杂志上报导EAP可分为A、BA、B、CA、CB五种型。进行了家系调查，有三个共显性等位基因：P(A）、P（B）、P（C）。在东方人群中，常见的基因为：P（A）、P（B）；
3、常见的表型为：A、BA、B。另有多个稀有基因的报导。EAP表型的检测1、1%琼脂糖凝胶电泳2、聚丙烯酰胺凝胶电泳显色：4-甲基伞形酮磷酸盐（EAP）---4-甲基伞形酮（长波紫外灯下）---兰色荧光。磷酸葡萄糖变位酶 （Phosphoglucomutase,PGM)概况PGM1（其基因在1号染色体）PGM2（其基因在4号染色体）PGM3（其基因在6号染色体）PGM4（其基因未详）红细胞中只有PGM1与PGM2，活性各半。PGM3主要在胎盘中。PGM4在哺乳期女性乳汁中。PGM1的等电点为5-7。
4、酶反应最适PH为8。分型1964年（Spencer),淀粉凝胶电泳，PGM可分出a,b,c,d,e,f,g七条带。分为三型：PGM1（a,c)、PGM2（b,d)PGM2-1(a,b,c,d)。e,f,g几乎每人都一样。1965年（Hopkinson),发现e,f,g带亦存在变异。前者称为PGM1，由PGM1（1）、PGM2（2）二个共显性等位基因控制，三种常见表型。后者称为PGM2。1976年（Bark)，用等电聚焦电泳，将PGM1分出十种常见的表型。分别由PGM1（1+）、PGM1（1-）、
5、PGM1（2+）、PGM1（2-）四个共显性等位基因控制。PGM1表型的检测1、淀粉凝胶电泳2、聚丙稀酰胺凝胶等电聚胶电泳显色：G1P（PGM、G16P）---G6P（G6PD、NADP）---6PG+NADP2NADP2+MTT（PMS）---兰色。脂酶D（EsteraseD,EsD）概况脂酶共有二十余种，可分为特异性脂酶和非特异性脂酶。红细胞中的脂酶有A、B、C、D四种，只有EsD具有多态性。等电点为4-6，酶反应的最适PH5.5。分型1973年（Hopkinson），分为三种常见表型。由E
6、SD1、ESD2二个共显性等位基因控制。ESD表型的检测1、1%琼脂糖凝胶电泳2、等电聚焦电泳显色：4-甲基伞形酮醋酸盐（ESD）---4-甲基伞形酮（长波紫外灯下）---兰色荧光。乙二醛酶I（GlyoxalaseI,GLOI)概况双亚基结构，分布广泛，红细胞中活性最高。等电点为4.3左右。酶反应的最适PH为6.5。基因位点与HLA基因毗邻（6P213）。分型1975年（Kompf）报导，三种常见表型。由GLOI（1）、GLOI（2）二个共显性等位基因控制。GLOI表型的检测琼脂糖/可溶性淀粉混
7、和凝胶电泳（1/0.7)显色：甲基乙二醛（GLOI、还原型GSH）---氧化型GHS。淀粉+碘---兰色（还原型GSH可使兰色褪掉）。谷丙转氨酶GlutamicPyruvicTransaminaseGPT概况催化谷氨酸与丙氨酸互换。双亚基结构。酶反应的最适PH为8左右。三种常见表型，由GPT（1）、GPT（2）二个共显性等位基因控制。GPT表型的检测混合淀粉凝胶电泳显色：1、丙氨酸（GPT）---谷氨酸（GLD、NADP）---NADPH2（MTT、PMS）---兰色。2、丙氨酸（GPT）---
8、谷氨酸+丙酮酸（LDH、NADH）---乳酸+NAD（无荧光）。血痕酶型检测血痕酶的改变有三方面：1、酶活性丧失（不可逆）。2、潮湿环境下，脱氨，蛋白负电荷增加，无法正确分型（仍有活性）。3、-SH被氧化，形成二硫化合物，可逆性失活（可用巯基还原剂复活）。0.18M巯基乙醇；0.05M二硫苏糖醇。血清蛋白型ProteinPolymorphism结合珠蛋白 （Haptoglobin,Hp)概况糖蛋白，三种常见表型：Hp1-1,Hp2-2,Hp2-1另有一种变异型为HP0型，在人群中的比率为0.81
