解淀粉芽孢杆菌

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1、生防菌解淀粉芽孢杆菌研究进展吴一晶,林艺芬,林河通,等(包装与食品机械,2012,30(6):49-52)解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens),属于芽孢杆菌属(Bacillussp.),是一种具有广谱抑菌活性的细菌,具有较强的次生代谢产物产生能力,能产生多种抑菌物质。1解淀粉芽孢杆菌生物学特性解淀粉芽孢杆菌,需氧,革兰氏染色阳性,呈短杆状(0.7~0.9μm×1.8~3.0μm),具有运动性,中生椭圆形孢子。硝酸盐还原阳性,接触酶阳性,水解淀粉,液化明胶,吲哚试验阴性,V

2、-P反应阴性,甲基红反应阴性。Luria-Bertani液体培养基中形成菌膜,在固体培养基上菌落呈淡黄色,不透明,表面粗糙,边缘不规则。解淀粉芽孢杆菌抑菌物质的提取、分离方法主要有大孔树脂法、酸碱沉淀法、硫酸铵沉淀法、色谱法等。经研究发现,解淀粉芽孢杆菌的抑菌物质主要是抑菌蛋白、脂肽类物质和聚酮化合物等。1抑菌蛋白张宝俊等采用盐酸沉淀法提取解淀粉芽孢杆菌LP-5发酵液的抗菌粗蛋白,并用DEAE-52离子交换层析和SephadexG-100凝胶层析进行纯化,得到一种等电点为6.33、分子量为20.3kD的

3、抗菌蛋白。刘俏等采用截留分子量为70000的双酚A型聚砜中空纤维膜超滤提取解淀粉芽孢杆菌活性蛋白。2脂肽类物质信珊珊等利用红外吸收光谱法对解淀粉芽孢杆菌WH1产抗菌活性物质进行了鉴定,推测其抗菌物质为Surfactin类脂肽。Caldeira等利用LC-ESI-MS和抗真菌试验相结合的方法,发现解淀粉芽孢杆菌CCMI1051的抗菌物质为具有抗真菌活性的Iturin和Surfactin,其分子量为1000~1100Da。Yu等应用FABMS/MSCID分析表明,具有抑制立枯丝核菌(Rhizoctonias

4、olani)的解淀粉芽孢杆菌B94的有效成分为3种IturinA的同分异构体。Rao等应用HPLC和MEKC方法研究了解淀粉芽孢杆菌B128的抑菌成分,结果表明其抑菌成分为IturinA,且应用RP-HPLC能很好地分离出IturinA的同分异构体。邓建良等通过PCR技术探索脂肽抗生素合成酶的相关基因,利用酸沉淀法制备活性粗提物,最后通过HPLC-ESI-MS和MALDI-TOF-MS对抗菌粗体液中活性物质进行定性定量分析,发现其抑菌成分主要是C14-FengycinA、C16-FengycinA、C1

5、7-FengycinA、C17-FengycinB和C16-IturinA等5种脂肽抗生素。Chen等利用酸沉降法得到抑菌粗提物,再通过生物活性制导分馏、真空闪蒸色谱法、半制备型高效液相色谱纯化,最后利用Q-TOF-MS分析表明其抑菌成分为C16-Fengy-cinA及一种新的6-AbuFengycin。3聚酮化合物聚酮化合物也是解淀粉芽孢杆菌重要的一类抑菌物质。有关学者从分子水平上对解淀粉芽孢杆菌抑菌相关基因进行了研究。Chen等分析了解淀粉芽孢杆菌FZB42全基因组序列,揭示了FZB42含有可编码具

6、抗菌作用的聚酮化合物的基因mln,bae及dfn。解淀粉芽孢杆菌具有较广的抑菌谱,对多种果蔬采后病原菌具有抑制作用,是一种新型保鲜技术,它具无污染、不产生抗药性、有利于人体安全等优点,有较好的发展前景。一般认为解淀粉芽孢杆菌的抑菌机理有如下几个观点:(1)产生抑菌物质。解淀粉芽孢杆菌主要通过产生对病原菌菌丝生长具有抑制作用的物质来达到保鲜的作用。(2)诱导抗病性。应用拮抗微生物处理果实,可导致寄主产生形态学上的改变,同时引发生理生化变化,进而引起寄主植物蛋白组和抗病相关基因表达水平的变化等。(3)与病原

7、菌竞争生存空间与营养物质。(4)与病原菌直接作用。除了产生抗菌素等次级代谢产物外,拮抗菌还会产生一系列对病原菌抑制起到重要作用的胞外水解酶。此外,有些拮抗菌会在病原菌菌丝上定殖,促使菌丝裂解。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)的研究进展车晓曦,李校堃北京农业2010年1月7-10解淀粉芽孢杆菌发酵条件与培养基配方优化的研究最终确定关键因子为葡萄糖、L-谷氨酸钠、转速和温度。最佳组合为葡萄糖42.00g/L、L-谷氨酸钠14.00g/L、温度27℃、转速200r/min。

8、培养基组分与发酵条件如下:蔗糖为0.25%、黄豆粕粉为1.50%、MgCL2为0.01%、MnSO4为0.01%、种龄12.00h、接种量4.00%、装瓶量100mL/250mL、培养基初始pH8.0、摇床转速200r/min和37℃发酵培养48.00h。芽孢生成率93.83%,相应的细菌数为2.28×108cfu/mL。解淀粉芽孢杆菌防治果蔬采后病害研究进展洪鹏,安国栋,胡美英,等中国农学通报2013,29(12):168-173目前,应

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