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1、西南民族大学学报·自然科学版第36卷第3期May.2010___________________________________________________________________JournalofSouthwestUniversityforNationalities⋅NaturalScienceEdition文章编号:1003-2843(2010)03-0431-03RP-HPLC法测定蝉拟青霉中腺苷的含量高宇明,曾锐(西南民族大学民族药物研究所,四川成都610041)摘要：目的：采用HPLC法测定蝉拟青霉中的腺苷含量方法：用DiamonsilC18柱(5μm,150mm×4.6
2、mm),以磷酸二氢钠-1水溶液(0.02mol·L)-乙腈(85：15)为流动相,流速1ml/min,检测波长260nm.结果：腺苷在浓度为12.5µg/ml-100µg/ml之间线性关系良好,r=0.9997,回归方程为y=29.915x-77.489,平均回收率为100.11%,RSD值为0.910%.结论：本方法方便、灵敏、准确,可用于该药物的质量控制.关键词：百令胶囊;腺苷;HPLC中图分类号:R284文献标识码:A蝉拟青霉Paecilomycescicadae(Miq.)Samson又名雌蝉花,属半知菌类或有丝分裂孢子真菌,为名贵中药蝉花的主要来源.蝉花可祛风止痉、透疹止痒、明目退翳
3、,治小儿惊风,心悸,夜啼,其主要成分为多糖类.有研究[1]证明蝉拟青霉具有与冬虫夏草相似的化学成分功能.冬虫夏草的主要有效成分也为多糖和腺苷.腺苷为合成三磷酸腺苷、腺嘌呤、腺苷酸等的重要中间体,对心血管系统等许多系统及组织均有生理作用.现今对蝉拟青霉中腺苷含量测定的研究较少,本实验对其进行了含量测定.该方法简便、精确、重复性好,可用于控制该药物的质量.1仪器、试剂与药品1.1仪器Thermo高效液相色谱仪,超声波清洗器(必能信超声有限公司),迪马DiamonsilC18柱(5μm,150mm×4.6mm)色谱柱,1.2试剂与药品色谱乙腈(迪马公司),水为超纯水,磷酸二氢钠为分析纯,腺苷对照品由
4、中国药品生物制品检定所提供,蝉拟青霉四批购于成都五块石中药材市场.2方法与结果2.1色谱条件-1迪马DiamonsilC18柱(5μm,150mm×4.6mm)色谱柱,流动相为磷酸二氢钠水溶液(0.02mol·L)-乙腈(85：15),检测波长260nm,柱温30℃,进样量10µl.理论塔板数按腺苷计不低于2000.在该条件下,腺苷峰峰形对称,分离良好,见图1、图2.2.2标准溶液的制备精密称取干燥至恒重的腺苷对照品适量,加入15%乙腈配置成浓度为1mg/ml,摇匀,即得.2.3样品溶液的制备取本品内容物,研细,取1g,精密称定,加入15%乙腈20ml,称定重量,超声30min,取出放冷,补足
5、减失的重量,摇匀,滤过,取滤液过0.45µm滤膜,即得.2.4方法学考察___________________________收稿日期：2010-03-02联系作者：曾锐(1977-),男,西南民族大学化学与环境保护工程学院副教授,博士.___________________________________________________________________432西南民族大学学报·自然科学版第36卷2.4.1标准曲线的制备分别精密吸取2.2项下标准溶液稀释成浓度为12.5µg/ml、25µg/ml、50µg/ml、75µg/ml、100µg/ml的溶液,注入液相色谱仪,按2.1项下
6、方法测定,记录峰面积,以峰面积为纵坐标,浓度(µg/ml)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：y=29.915x-77.489,r=0.9997.实验结果证明,腺苷腺苷在进样浓度为12.5µg/ml-100µg/ml之间线性关系良好.图1腺苷对照品色谱图(1腺苷)图2蝉拟青霉色谱图(1腺苷)图3腺苷阴性对照图2.4.2精密度试验取对照品溶液,连续重复进样5次,每次10µl,记录峰面积,计算得峰面积的RSD值为1.47%,表明仪器精密度良好.2.4.3重复性试验取同一批号样品5份,精密称定,按2.3项下样品制备方法制备样品溶液,按2.1项下方法注入液相色谱仪测定,记录峰面积,计算腺苷平均含量为
7、0.150%,RSD值为1.55%.2.4.4稳定性试验取同一份供试品溶液,分别于0、2、4、8、16h按2.1项下进样,记录峰面积,计算得腺苷平均含量为0.148%,RSD值为2.33%,表明样品溶液在16h内稳定.2.4.5加样回收率试验___________________________________________________________________第3期高宇明等:RP-H
