乙型肝炎病毒血清学标志物（HBV-M）的检出及应用

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1、医学论文-乙型肝炎病毒血清学标志物（HBV-M）的检出及应用       HBV是乙型肝炎的病原体，乙型肝炎患者潜伏期、急性期及乙型肝炎病毒携带者的血液具有高传染性，接触极微量的（10-7～10-6ml）的血液即可引起感染。乙型肝炎危害极大，约10%的乙型肝炎转变为慢性肝炎（CH），部分慢性活动性肝炎（CAH）转变为肝癌（HCC）。婴幼儿感染HBV易形成持续病毒携带者，HBV病毒携带者发生原发性肝癌的危险性更大。而我国又是乙型肝炎高感染国家，据统计，全国人口10%以上为HBsAg携带者，乙型肝炎病毒的总感染率为35.5%～61.1%。由于可进行定量分析，对药物疗效和病情监测都具有重要意义。本实

2、验用三种不同的方法检测了HBV-M，旨在探讨三种方法在日常生活工作中的可行性与相关性。现将实验结果报告如下。        1 材料与方法        1.1 材料        1.1.1 健康人血清 采用TRFIA、MEIA、ELISA对200例健康职工经HBV-M五项指标做定性（量）分析，随机抽取50例作为正常对照，年龄1～45岁。        1.1.2 乙型肝炎患者血清 用TRFIA、MEIA、ELISA对50例强阳性或临界值血清样本做HBV-M五项指标检测，年龄1/12岁～81岁。         1.1.3 质控血清 卫生部临检中心质量控制血清浓度分别为：0.2ng/ml，0

3、.5ng/ml，1.0ng/ml，2.0ng/ml,5.0ng/ml；内蒙古临检中心质控血清：0.3ng/ml,1.0ng/ml,2.0ng/ml，5.0ng/ml。        1.2 诊断试剂、仪器与方法        1.2.1 诊断试剂与仪器 TRFIA分析法使用上海新波生物技术有限公司生产的ANYTEST2000型时间分辨荧光免疫检测系统和SYM-BIO BGATE2310全自动微孔洗涤机及配套试剂。MEIA分析法使用美国Abbott试剂和AXSYM 全自动酶免发光分析系统；ELISA法使用北京万泰药业公司及3V公司生产的试剂。洗板机为天石医疗用品制作所ZMX-998B型自动酶标洗

4、板机；酶标仪为奥地利CliniBio 128C自动酶标仪和SHANDONG GAOMI CAIHONG ANALYTICAL INSTRUMENTS CO.LTD的GF-M2000 MICROPLATE READER。        1.2.2 方法 TRFIA（Time resolved fluoroimmuno assay，时间分辨荧光免疫技术）技术是以镧系元素铕化合物作为荧光标记物，利用这一荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再进行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地消除非特异本底荧光的干扰，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接

5、受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。         2 结果与分析        2.1 TRFIA和ELISA检测定性结果分布得出        HBsAg：灵敏度48/（48+1）×100%=97.96%，特异性50/（50+1）×100%=98.04%，诊断符合率98.00%；同理：HBsAb：灵敏度为93.47%，特异性81.48%，诊断符合率97.00%；HBeAg：灵敏度为96.55%，特异性97.18%，诊断符合率97.00%；HBeAb：灵敏度为90.91%，特异性89.74%，诊断符合率90.00%；HBcAb：灵敏

6、度为95.92%，特异性92.16%,诊断符合率94.00%。        2.2 TRFIA和MEIA检测定性结果分布TRFIA和MEIA检测定性结果分布得出        HBsAg灵敏度48/（48+1）×100%=97.95%；特异性51/（51+1）×100%=98.08%；诊断符合率98%；同理：HBsAb： 灵敏度为100%，特异性85.45%，诊断符合率92%；HBeAg：灵敏度为96.97%，特异性98.57%，诊断符合率98.00%；HBeAb：灵敏度为95.83%，特异性93.42%，诊断符合率94.00%；HBcAb：灵敏度为98.00%，特异性96.00%，诊断符合

7、率97.00%。        2.3 ELISA和MEIA检测定性结果分布ELISA和MEIA检测定性结果分布得出        HBsAg： 灵敏度49/（49+0）×100%=100%；特异性51/（51+0）×100%=100%；诊断符合率99.00%；同理：HBsAb： 灵敏度为100%，特异性98.18%，诊断符合率99.00%；HBeAg：灵敏度为96.67%，特异性98.57%，诊