乙型肝炎病毒血清学标志物（hbv

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1、乙型肝炎病毒血清学标志物（HBV1材料与方法1.1材料1.1.1健康人血清采用TRFIA、MEIA、ELISA对200例健康职工经HBV-M五项指标做定性（量）分析，随机抽取50例作为正常对照，年龄1～45岁。1.1.2乙型肝炎患者血清用TRFIA、MEIA、ELISA对50例强阳性或临界值血清样本做HBV-M五项指标检测，年龄1/12岁～81岁。1.1.3质控血清卫生部临检中心质量控制血清浓度分别为：0.2ng/ml，0.5ng/ml，1.0ng/ml，2.0ng/ml,5.0ng/ml；内蒙

2、古临检中心质控血清：0.3ng/ml,1.0ng/ml,2.0ng/ml，5.0ng/ml。1.2诊断试剂、仪器与方法1.2.1诊断试剂与仪器TRFIA分析法使用上海新波生物技术有限公司生产的ANYTEST2000型时间分辨荧光免疫检测系统和SYM-BIOBGATE2310全自动微孔洗涤机及配套试剂。MEIA分析法使用美国Abbott试剂和AXSYM全自动酶免发光分析系统；ELISA法使用北京万泰药业公司及3V公司生产的试剂。洗板机为天石医疗用品制作所ZMX-998B型自动酶标洗板机；酶标仪为奥

3、地利CliniBio128C自动酶标仪和SHANDONGGAOMICAIHONGANALYTICALINSTRUMENTSCO.LTD的GF-M2000MICROPLATEREADER。1.2.2方法TRFIA（Timeresolvedfluoroimmunoassay，时间分辨荧光免疫技术）技术是以镧系元素铕化合物作为荧光标记物，利用这一荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再进行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地消除非特异本底荧光的

4、干扰，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。2结果与分析2.1TRFIA和ELISA检测定性结果分布得出HBsAg：灵敏度48/（48+1）×100%=97.96%，特异性50/（50+1）×100%=98.04%，诊断符合率98.00%；同理：HBsAb：灵敏度为93.47%，特异性81.48%，诊断符合率97.00%；HBeAg：灵敏度为96.55%，特异性97.18%，诊断符合率97.00%；HBe

5、Ab：灵敏度为90.91%，特异性89.74%，诊断符合率90.00%；HBcAb：灵敏度为95.92%，特异性92.16%,诊断符合率94.00%。2.2TRFIA和MEIA检测定性结果分布TRFIA和MEIA检测定性结果分布得出HBsAg灵敏度48/（48+1）×100%=97.95%；特异性51/（51+1）×100%=98.08%；诊断符合率98%；同理：HBsAb：灵敏度为100%，特异性85.45%，诊断符合率92%；HBeAg：灵敏度为96.97%，特异性98.57%，诊断符合率9

6、8.00%；HBeAb：灵敏度为95.83%，特异性93.42%，诊断符合率94.00%；HBcAb：灵敏度为98.00%，特异性96.00%，诊断符合率97.00%。2.3ELISA和MEIA检测定性结果分布ELISA和MEIA检测定性结果分布得出HBsAg：灵敏度49/（49+0）×100%=100%；特异性51/（51+0）×100%=100%；诊断符合率99.00%；同理：HBsAb：灵敏度为100%，特异性98.18%，诊断符合率99.00%；HBeAg：灵敏度为96.67%，特异性9

7、8.57%，诊断符合率98.00%；HBeAb：灵敏度为91.67%，特异性100%，诊断符合率98.00%；HBcAb：灵敏度为98.00%，特异性100%，诊断符合率99.00%。2.4分析比较2.4.1当CUTOFF值设置为≥0.3ng/ml时，HBsAg：TRFIA1例阳性，表现为“小三阳”，而ELISA阴性，其浓度为0.4ng/ml，结果仅为HBeAb和HBcAb阳性，提示TRFIA由于相对敏感而检出，而MEIA与TRFIA基本一致。但就临界标本而言，TRFIA、ELISA、MEIA均

8、存在一定的假阳性率、假阴性率分别为1.96%、2.04%。就随机样本而言，ELISA、MEIA则HBsAg较易出假阳性、假阴性反应。实际工作中HBsAg的CUTOFF值设为0.5ng/ml。2.4.2当CUTOFF值设置为≥0.03NCU/ml时，TRFIA法HBeAg2例阳性，而ELISA阴性，经过综合分析，这2例为真阳性。而MEIA仅有1例阳性，说明三种方法均有一定的漏检TRFIA法测HBeAg灵敏度、特异性、结果符合率就随机样本而言，要高于ELISA、MEIA。因本项目标本所选取大多为强阳