《内毒素的测定》PPT课件

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1、内毒素和1，3-β-D-葡聚糖检测的临床应用主要内容内毒素的来源及结构内毒素的生物学活性内毒素检测的临床应用内毒素的检测方法及参考范围检测样本的采集及影响因素内毒素概述内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁结构中的脂多糖（LPS），这些成分只在细菌死亡裂解后才释放到菌体外或活菌以发泡形式将其释出。外层菌体多糖（O抗原），与细菌侵袭力有关。中层同一种属之间是相同的。内层特殊的糖磷脂，起毒性作用，而无种属特异性。特异性多糖核心多糖类脂A内毒素的结构发热反应1激活血管活性物质的释放2激活凝血和纤溶系统3内毒素的生物学活性直接或间接损害肝脏5激活白三烯、前列腺素及单

2、核巨噬系统6内毒素的生物学活性激活补体4内毒素的有益作用增加机体非特异性免疫力1防御放射性损伤，促进粒细胞生成2增加网状内皮系统功能3抗肿瘤，免疫佐剂作用4内源性内毒素血症外源性内毒素血症产生原因肠道内毒素的吸收1败血症时血中细菌的释放23有效的抗菌治疗后，细菌崩解输入了含有细菌的药物、血液或者体液等。内毒素血症临床症状主要决定于宿主对内毒素的抵抗力。症状和体征有：发热，白细胞数变化，出血倾向，心力衰竭、肾功能减退、肝脏损伤、神经系统症状，以及休克、血压下降、组织灌流不足、缺氧及酸中毒等。内毒素血症的临床症状最严重的后果：致死性感染性休克，多器官功

3、能衰竭，DIC等。病死率极高。肺炎100%、尿路感染70-80%、腹腔感染72-84%、烧伤85%、急性胰腺炎90%、败血症70%、急性肝炎37-64%、暴发性肝炎58-100%、丙肝61.54%、胆石症伴急性梗阻性化脓性感染85%、多器官功能衰竭100%。各类疾病内毒素血症的发生率内毒素检测的临床应用在肝胆疾病中的应用1在呼吸系统感染中的应用2在胰腺疾病中的应用3在溃疡性结肠炎中的应用4在全身性细菌感染中的应用5在不明原因发热中的应用6内毒素检测在医院中的应用在医院灭菌制剂检验中应用1对注射器、输液器等医疗器械的内毒素检测2在透析站和血站中的应用

4、3在临床医学研究中的应用4鲎试验是1968年由Levin和Bang建立。其原理是利用鲎的变形细胞与微量内毒素产生凝集反应的现象，作为判断试品中细菌内毒素含量的一种方法。内毒素的检测方法背面观就像是古代武士的心甲腹面观腹部基本呈六角形，还可以看到它发达的附肢内毒素的检测原理革兰阴性菌脂多糖（内毒素）检测原理：革兰阴性菌脂多糖（内毒素）激活酶反应主剂中的相应因子后形成凝固蛋白，根据其引起的浊度变化对革兰氏阴性菌脂多糖（内毒素）浓度进行定量测定。内毒素的检测原理GG内毒素的检测方法鲎试剂（LimulusamebocytelysateLAL)凝胶法——0.

5、03EU/ml范围内半定量1浊度法——0.006-300EU/ml,检测范围大2比色法——0.006-15EU/ml范围内定量3ELISA——0.1pg/ml4流式细胞术——测内毒素的量而不是活性5化学发光测定法6内毒素检测的参考值检测值﹤10pg/ml,阴性。检测值介于10～20pg/ml之间，临床观察期，建议动态采血检测。检测值﹥20pg/ml，阳性，建议再次采血以确诊。肝炎败血症肿瘤内毒素浓度50-32020-100020-700检测样本的采集及影响因素检测样本：血液采集要求：采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管。常规病人早上用药治

6、疗前空腹采血/取样（血透患者透析前采血）。样本保存：样本采集后应在3000转/分进行离心，若不能及时检测，应将血浆转移至无热原转移管内，在-30℃冰箱中冷冻保存，一周内使用。特殊标本处理：对一般黄疸、溶血、乳糜血标本，稀释2~5倍后进行检测；对于严重的黄疸、溶血、乳糜血标本，应重新采血。影响结果的因素产生假阳性的原因有：操作环境及操作过程中污染，应用某些抗生素类如-酰胺内酯类、喹喏酮类等患者。MB-80微生物快速动态检测系统(1-3)--D-葡聚糖侵袭性真菌感染的定义定义:指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病，

7、危害性较大。条件致病性真菌念珠菌属曲霉属其他侵袭性真菌感染的特点1.不产生内毒素和外毒素致病机理不明4.早期症状无特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死亡率高2.致病力一般较弱，机体免疫低下时发生3.感染菌种变化，白色念珠菌感染下降，曲霉菌感染增长趋势上升明显侵袭性真菌感染（IFI）现状IFI发生率不断增加；IFI感染病死率很高；IFI诊断困难及漏诊情况严重。1.内源性诱因2.外源性诱因影响机体抵抗力的各种疾病，如白血病、癌症、结核、肺脓肿、糖尿病、肝脏疾病以及维生素缺乏等广谱抗生素，抗肿瘤药物和免疫抑制剂；插管等侵袭性治疗，骨髓和实体器官

8、移植；免疫缺陷综合症侵袭性真菌感染的诱因国内侵袭性真菌感染不容忽视刘正印等，中华医学杂志2003,83(5):399-40