LCMS技术在中药分析的应用

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1、LC-MS技术在中药分析的应用（一）宋越2007/05质谱与液质联用技术原理概念质谱法是将样品离子化，变为气态离子混合物，然后利用不同离子在电场或磁场中运动行为的不同，把离子按质荷比（m/z）分离的分析技术。通过所得到的样品的质谱和相关信息，进行定性与定量分析。质谱仪是实现上述分离分析技术,从而测定物质的质量与含量及其结构的仪器。质谱分析的基本过程样品的离子化用适当的方法使样品分子转变为气态离子，对于有机化合物，如果在离子化过程中接受了过多的能量，新生成的分子离子(molecularion)会进一步裂解，生成各种碎片离子(fragme

2、ntions)。离子的分离、分析、检测。数据采集与处理。常用术语质荷比m/z,，是离子的质量和该离子所带静电单位数的比值。基峰与相对强度基峰（basepeak）是质谱图中的最强峰。质谱峰的强度常以相对强度（relativeintensity）衡量。以基峰的强度为100，算出各个质谱峰的相对百分强度。分子离子分子离子是样品分子失去或得到一个电子而形成的。分子离子代表完整的样品分子，是其所有碎片离子的终极前体(ultimateprecursor)。准分子离子取决于化合物的性质和质谱离子化方法及条件，可生成质子化或去质子的分子，即[M+H]

3、+、[M-H]－及加合物离子，如[M+Na]+、[M+Cl]－等，这些均为偶电子（evenelectron）离子。同位素峰这是由于有丰度较低的同位素存在而产生的。质谱仪质谱仪由以下几部分组成进样系统质量过滤器样品离子化进样系统直接进样杆（directinletprobe,DIP）加热贮槽进样器（heatablereservoirinlet）气相色谱/质谱法（gaschromatography/massspectrometry,GC/MS）液相色谱/质谱法（liquidchromatography/massspectrometry,LC

4、/MS）毛细管电泳/质谱法(capillaryelectrophoresischromatography/massspectrometry,CE/MS)LC-ESI/MS进样系统输注(infusion)注射器泵（syringepump）将样品溶液直接缓慢输入ESI/MS离子源。这种方法简便、快速。缺点是需要相对多的样品（通常将样品配成溶液，样品体积大于10l）；样品中其它物质可能产生干扰；难于实现自动进样分析。流动注射（flowinjection）将样品溶液置于HPLC进样系统，由LC泵缓慢推动溶剂将注入的样品溶液直接输入ESI/M

5、S离子源。这个方法同样简便、快速；样品溶液的用量可很小（如0.1L）；易于实现自动进样分析。缺点是样品中盐和其它成分可能干扰测定；进样过程中样品溶液可能被稀释，从而降低检测限。☺离子源作用使被分析样品的原子或分子转化为带电粒子(离子)的装置,并对离子进行加速常见离子化方法EI(ElectronImpactIonization)：电子轰击电离——硬电离CI(ChemicalIonization)：化学电离——核心是质子转移FD(FieldDesorption)：场解吸——目前基本被FAB取代FAB(FastAtomBombardmen

6、t)：快原子轰击MALDI(MatrixAssistedLaserDesorption)：基体辅助激光解吸，基质辅助激光解吸电离电子轰击离子化(electronimpactionization,EI)主要用于挥发性样品的电离，由GC或直接进样杆进入的样品，以气体形式进入离子源，由灯丝F发出的电子与样品分子发生碰撞使样品分子电离。在70ev电子碰撞作用下，有机物分子可能被打掉一个电子形成分子离子，也可能会发生化学键的断裂形成碎片离子。快原子轰击源（FastAtomicbombardment,FAB）主要用于极性强、分子量大的样品分析。例

7、如肽类、低聚糖、天然抗生素、有机金属络合物等。FAB源得到的质谱不仅有较强的准分子离子峰，而且有较丰富的结构信息。激光解吸离子化(laserdesorptionionization,LDI)利用一定波长的脉冲式激光(短脉冲)照射样品使样品电离的一种电离方式。基质辅助激光解吸离子化（matrix-assistedlaserdesorptionionization,MALDI）脉冲工作方式，适合于TOF，FTMS,属于软电离技术，适合于分析生物大分子，如肽、蛋白质、核酸等。得到的质谱主要是分子离子，准分子离子。碎片离子和多电荷离子较少。常

8、用的基质有2，5二羟基苯甲酸、芥子酸、烟酸、α-氰基-4-羟基肉桂酸等表面增强激光解吸离子化（surface－enhancedlaserdesorptionionization,SELDI）常见离子化方法大气压离子化（a