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1、2010年11月绵阳师范学院学报Nov.2010第29卷第11期JournalofMianyangNormalUniversityVo.l29No.11高效液相色谱法测不同茶叶中EGCG的含量11211*孙晓琴,徐晓兰,周凡,贾巧,李龙,李猛,边清泉(绵阳师范学院1.化学与化学工程学院;2.生命科学与技术学院,四川绵阳621000)摘要:采用高效液相色谱法对不同茶叶中的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的含量进行分析。采用-1C18色谱柱(4.6mm@250mm,5Lm),流动相为甲醇:水:乙酸(23:75:2,v/v),流速1
2、.0mL#min,柱温35e,检测波长为272nm。EGCG线性范围为0.11~1.71Lg,相关系数r=0.9996,平均回收率98.7%,RSD为0.7%。本方法分析速度快,灵敏度高,分离效果好,可作为测定茶叶中EGCG含量的方法。关键词:高效液相色谱;茶叶;表没食子儿茶素没食子酸酯;含量中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1672-612x(2010)11-0042-04茶多酚(teapolyenohs,Tp)是茶叶的有效成分之一,主要由儿茶素、黄酮、酚酸、花色素4大类物质组[1][2~3]成。作为茶多酚主要成分
3、的儿茶素(catechins)占其总量的60%~80%。主要包括的单体化合物有表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯[4](EGCG)等。EGCG是儿茶素中的一种主要酯型儿茶素(结构见图1)。现代科学研究表明EGCG具有显著的抗突变、抗氧化作用,能够增强免疫系统功能,抑制肝脂和胆固醇的增长,抑制肿瘤的生长,对痢疾、伤[5,6]寒、金黄色葡萄球菌等细菌也有极强的抑制作用。尤其对于心血管疾病来说,能起到保护内皮作用,具[7,8]有促进血管舒张、预防传染病、防止氧化破坏、防止炎
4、症、防止血小板凝结等非常明确的基本功效。目前对EGCG的分离提取及功效研究的文献较多,但对川产绿茶中EGCG含量的比较研究尚无文献报道。本文通过对3种川产绿茶中EGCG含量的测定,为人们根据身体的实际需要选择不同品种茶叶提供参考,为以茶叶为原料制备EGCG单体的企业选择原料提供实验依据。1实验部分1.1仪器与试剂LC-20AT型高效液相色谱仪(日本岛津公司),包括DAD检测器,CLASS-vp5.0色谱数据处理站,CTD-6A色谱柱温箱,电子分析天平,恒温水浴锅(XMTD-2M)、FW-80型粉碎机(天津市泰斯仪器有限公司),KQ
5、-250DE型医用数控超声波清洗器,101-2A型电热鼓风恒温干燥箱。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCE)(美国sigma公司,含量:95%)甲醇为色谱纯试剂,其他试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。3种茶叶购于四川省绵阳太明茶行,分别为明前萃明(四川省平武茶业有限责任公图1EGCG的结构司)、绿茶(四川省北川羌族自治县春绿茶厂)、高山茶(广州市高Fig.1ThestructureofEGCG大海茶行出品)。1.2色谱条件色谱柱为PHENONMENEXC18色谱柱(5Lm,4.6mm@250mm),流动相:甲醇:水:乙酸(23:
6、75:2,v/-1v);流速:1.0mL#min;检测波长:272nm;柱温:35e;进样量:10LL。灵敏度为0.050AUFS。收稿日期:2010-10-8基金项目:绵阳市科技局自然科学研究重点项目(10S002-2);绵阳师范学院科学研究项目(hx2010-2011-20)作者简介:孙晓琴(1989-),女,绵阳师范学院化学与化学工程学院2007级本科学生。﹡通讯作者:E-mai:lbian-55@sohu.com第11期高效液相色谱法测不同茶叶中EGCG的含量#43#1.3样品制备1.3.1对照品溶液的制备精密称取14.2
7、4mg经干燥处理后的表没食子儿茶素没食子酸酯对照品,置于100ml容量瓶中,加水溶解并定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液,于冰箱中低温保存备用。表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为-1142.4Lg#mL。1.3.2供试品溶液的制备将三种待测定原料茶叶粉碎,过0.3mm筛。分别准确称取样品约0.05g,置于50mL锥形瓶中,加水40mL,置100e的水浴中,每隔30s振荡一次,续浸1h。取出锥形瓶,冷却至室温后,并用少量水洗涤锥[9]形瓶和残渣2-3次,定容至50.00mL量瓶中,摇匀,0.45Lm微孔滤膜过滤,取续滤液待测。2方法与结果
8、2.1目标组分的确定在1.2项色谱条件下,分别注入对照品溶液和3种供试品溶液10LL,在波长为272nm下测定,经DAD检测器全波段紫外扫描,对照品与3种样品7.8min保留值处紫外光谱图一致,由此确定各样品7.8min处特征峰为EGCG组分峰,其
