高效液相色谱法检测鲫鱼不同组织中的胶原蛋白含量

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1、※成分分析食品科学2015,Vol.36,No.1465高效液相色谱法检测鲫鱼不同组织中的胶原蛋白含量1,211111111,*贡雯玉，卞欢，吴海虹，王道营，耿志明，刘芳，张牧焓，徐为民，诸永志（1.江苏省农业科学院农产品加工研究所，江苏南京210014；2.南京农业大学教育部肉品加工与质量控制重点实验室，江苏南京210095）摘 要：为提高水产品胶原蛋白的利用率，采用柱前衍生-高效液相色谱法对鲫鱼鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中的羟脯氨酸含量进行检测，再将羟脯氨酸含量换算成相应胶原蛋白的含量。鲫鱼样品经盐酸110℃水解18h，丹磺酰氯衍生，采用高效液相色谱-紫外法进行

2、检测。色谱柱：反相C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：A为甲醇，B为四氢呋喃-甲醇-0.05mol/L乙酸钠（1∶15∶84，V/V）溶液，采用梯度洗脱；流速1mL/min；柱温40℃；2检测波长254nm。结果表明：羟脯氨酸在20～400μg/mL范围内呈现良好的关系（R=0.9998），最低检测限为0.18μg/g，不同水平的平均回收率为80.22%～83.33%，相对标准偏差范围为0.31%～1.84%。实际样品分析显示，鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中胶原蛋白含量分别为106.62、24.75、166.94、115.05mg/g。本实验建立的分析

3、方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性，可用于水产品不同组织中胶原蛋白的定量分析。关键词：鲫鱼；羟脯氨酸；胶原蛋白；高效液相色谱法DeterminationofCollageninDifferentTissuesofCrucianCarp(Carassiusauratus)byHighPerformanceLiquidChromatography1,211111111,*GONGWenyu,BIANHuan,WUHaihong,WANGDaoying,GENGZhiming,LIUFang,ZHANGMuhan,XUWeimin,ZHUYongzhi(1.Insti

4、tuteofAgriculturalProductsProcessing,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing210014,China;2.KeyLaboratoryofMeatProcessingandQualityControl,MinistryofEducation,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract:Inordertoimprovetheutilizationofcollageninfisheryproducts,ahighpe

5、rformanceliquidchromatographic(HPLC)methodwithpre-columnderivatizationwasestablishedtodeterminehydroxyprolineintheskin,meat,scale,andblubberofthecruciancarpCarassiusauratusandthecontentofcollagenwascalculatedbasedonhydroxyprolinelevelsinsamples.Sampleswerehydrolyzedbyhydrochloricacidat

6、110℃for18h,followedbypre-columnderivatizationswithdansylchloride.HydroxyprolinewasdeterminedbyHPLCconnectedtoanultravioletdetector(HPLC-UV).Thechromatographicconditionsweresetasfollows:column,C18(250mm×4.6mm,5μm);mobilephase,A:methanol,B:tetrahydrofuran-methanol-0.05mol/Lsodiumacetate(

7、1:15:84,V/V);flowrate,1.0mL/min;columntemperature,40℃;anddetectionwavelength,254nm.Resultsshowedagoodlinearrelationshipexistedwhenhydroxyprolinewasintherangeof220-400μg/mL(R=0.9998).Thelimitofdetection(LOD)was0.18μg/gandtheaveragerecoverieswere80.22%–83.33%withrelativestandarddeviatio