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1、※成分分析食品科学2015,Vol.36,No.1465高效液相色谱法检测鲫鱼不同组织中的胶原蛋白含量1,211111111,*贡雯玉,卞欢,吴海虹,王道营,耿志明,刘芳,张牧焓,徐为民,诸永志(1.江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;2.南京农业大学教育部肉品加工与质量控制重点实验室,江苏南京210095)摘 要:为提高水产品胶原蛋白的利用率,采用柱前衍生-高效液相色谱法对鲫鱼鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中的羟脯氨酸含量进行检测,再将羟脯氨酸含量换算成相应胶原蛋白的含量。鲫鱼样品经盐酸110℃水解18h,丹磺酰氯衍生,采用高效液相色谱-紫外法进行
2、检测。色谱柱:反相C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:A为甲醇,B为四氢呋喃-甲醇-0.05mol/L乙酸钠(1∶15∶84,V/V)溶液,采用梯度洗脱;流速1mL/min;柱温40℃;2检测波长254nm。结果表明:羟脯氨酸在20~400μg/mL范围内呈现良好的关系(R=0.9998),最低检测限为0.18μg/g,不同水平的平均回收率为80.22%~83.33%,相对标准偏差范围为0.31%~1.84%。实际样品分析显示,鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中胶原蛋白含量分别为106.62、24.75、166.94、115.05mg/g。本实验建立的分析
3、方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于水产品不同组织中胶原蛋白的定量分析。关键词:鲫鱼;羟脯氨酸;胶原蛋白;高效液相色谱法DeterminationofCollageninDifferentTissuesofCrucianCarp(Carassiusauratus)byHighPerformanceLiquidChromatography1,211111111,*GONGWenyu,BIANHuan,WUHaihong,WANGDaoying,GENGZhiming,LIUFang,ZHANGMuhan,XUWeimin,ZHUYongzhi(1.Insti
4、tuteofAgriculturalProductsProcessing,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing210014,China;2.KeyLaboratoryofMeatProcessingandQualityControl,MinistryofEducation,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract:Inordertoimprovetheutilizationofcollageninfisheryproducts,ahighpe
5、rformanceliquidchromatographic(HPLC)methodwithpre-columnderivatizationwasestablishedtodeterminehydroxyprolineintheskin,meat,scale,andblubberofthecruciancarpCarassiusauratusandthecontentofcollagenwascalculatedbasedonhydroxyprolinelevelsinsamples.Sampleswerehydrolyzedbyhydrochloricacidat
6、110℃for18h,followedbypre-columnderivatizationswithdansylchloride.HydroxyprolinewasdeterminedbyHPLCconnectedtoanultravioletdetector(HPLC-UV).Thechromatographicconditionsweresetasfollows:column,C18(250mm×4.6mm,5μm);mobilephase,A:methanol,B:tetrahydrofuran-methanol-0.05mol/Lsodiumacetate(
7、1:15:84,V/V);flowrate,1.0mL/min;columntemperature,40℃;anddetectionwavelength,254nm.Resultsshowedagoodlinearrelationshipexistedwhenhydroxyprolinewasintherangeof220-400μg/mL(R=0.9998).Thelimitofdetection(LOD)was0.18μg/gandtheaveragerecoverieswere80.22%–83.33%withrelativestandarddeviatio