药物分析-样品的前处理

《药物分析-样品的前处理》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第四章药物定量分析与分析方法验证ChinaPharmaceuticalUniversitywww.cpu.edu.cn中国药科大学药物分析教研室第四章药物定量分析与分析方法验证定量分析样品前处理方法定量分析方法特点药品质量标准分析方法验证123氧瓶燃烧法样品吸收液测定方法含氟有机药物H2OpH4.3HAc-NaAcBuffer茜素氟蓝分光光度法含氯有机药物NaOH溶液银量法汞量法分光法含溴有机药物H2O2-NaOH液或NaOH液-银量法分光法硫酸肼饱和液含碘有机药物NaOH液-银量法碘量法硫酸肼饱和液汞量法分光法碘苯

2、酯含量测定取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用NaOHT.S.2ml与H2O10ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液10ml，密塞，振摇放置数分钟，加甲酸约1ml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约3~5min，以除去剩余的溴蒸气，加KI2g，密塞，摇匀，用Na2S2O3液(0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的硫代硫酸钠液(0.02mol/L)相当于1.388mg的C19H29IO2二、药品质量标准分析方法验证指导原则药品质量

3、标准分析方法验证药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则药物稳定性试验指导原则缓释、控释制剂指导原则微囊、微球与脂质体制剂指导原则细菌内毒素检查法应用指导原则第三节药品质量标准分析方法验证目的：证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求效能指标：评价分析方法的尺度效能指标包括:精密度,准确度,检测限,定量限,选择性(选择性),线性与范围,耐用性(1)准确度（accuracy）：测量值与真实值接近的程度表示:回收率测定方法：回收试验加样回收试验(2)精密度（precision）：定义:同一样品多次测量值之间相互接近的

4、程度表示：标准偏差(s),相对标准偏差(RSD)重复性:同一实验室,同一人多次测定的精密度中间精密度:同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度重现性:不同实验室，不同人测定的精密度(3)专属性（specificity）:指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性)。(4)检测限（limitofdetection，LOD）：药物能被检出的最低浓度(µg/ml)测定:信噪比法(S:N=3:1)(5)定量限（1imitofquantitation，LOQ）：药物能被定量测出的最低浓度

5、(µg/ml)测定:信噪比法(S:N=10:1)第三节药品质量标准分析方法验证------------性能指标(6)线性与范围（linearityandrange）：待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围线性关系：Y=a+bx（r=0.9999)线性程度：相关系数(7)耐用性（robustness）:测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH，商品柱的品牌，柱温等第三节药品质量标准分析方法验证------------性能指标检验项目和验证内容：项目内容鉴别杂质测定含量测定及溶

6、出量测定定量限度准确度＋＋精密度－＋重复性＋＋中间精密度＋①＋①专属性②＋＋＋＋检测限－③＋－定量限＋－线性＋＋范围＋＋耐用性＋＋＋①已有重现性验证，不需验证中间精密度②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充③视具体情况予以验证第四节生物样品分析的基本步骤1.药物从蛋白结合或缀合物中释出⑴蛋白变性：如应用三氯醋酸、HClO4、有机溶剂(乙醇、丙酮、乙腈)使蛋白沉淀⑵盐酸水解⑶酶消化法：最常使用蛋白水解酶中枯草菌溶素(一种细菌性蛋白分解酶，可在pH7.0~11.0使肽键降解)定量分析方法的验证----------生

7、物样品分析（一）特异性内源性物质不得干扰原药、代谢物（二）标准曲线r≥0.9900，至少5个浓度，不许外延（三）精密度和准确度RSD≤15％、20％相对回收率85～115％（80～120％）（四）最低定量限LOQ3~5倍t1/2，或1/10～1/20倍Cmax（五）样品稳定性室温、冻融、冰冻长期（六）提取回收率（绝对回收率）一般低于100％，须稳定（七）质控样品已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中，以确保定量测定的准确度定量分析方法的验证----------生物样品分析样品固相净化及反相高效液相色谱法测定血浆中茶碱伍

8、朝筼等药学学报,1989,24(10):769~773血浆样品净化后空白血浆净化前空白血浆ColumnZorbaxC185µm2.5cm4.6mm254nmPrecolumnYWG-ODS9-11µm54.6mmMobilePhase:甲醇-醋酸钠(0.05mol/LpH3.0)50׃5012840min茶碱咖啡因12840m