超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞诱导分化为神经细胞的体外研究

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1、IlJ西医科大学硕士学位论文超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞诱导分化为神经细胞的体外研究中文摘要背景：一些研究者利用超顺磁性氧化铁对骨髓问充质干细胞进行标记，并利用MRI技术对标记细胞肝内、肾内移植后进行初步的活体示踪，但是，对于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后，对其存活、增殖以及分化是否有影响研究较少。目的：观察超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后，对其存活、增殖以及向神经细胞的分化是否有影响。方法：使用超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓间充质干细胞，采用普鲁士蓝染色法鉴定其标记率、台盘蓝染色法检测细胞活力、MTT法检测标记干细胞的细胞增值活力、以1嘲ol几

2、§一巯基乙醇及无血清DMEM培养液体外诱导标记细胞向神经细胞分化并用免疫组织化学鉴定诱导后细胞、再次使用普鲁士蓝染色法鉴定神经细胞内的铁颗粒。结果与结论：普鲁士蓝染色对干细胞的标记率接近100％，台盘蓝染色显示标记细胞的存活率不受影响；MTT法检测发现标记干细胞的增殖活力与未标记干细胞相比差异无显著性意义(尸>0．05)；以B一巯基乙醇诱导后大部分骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞、免疫组织化学阳性，再次普鲁士蓝染色显示铁颗粒位于神经细胞的细胞浆内。提示超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后，对于干细胞的存活、增殖以及向神经细胞的分化无影响。关键词：超顺磁性氧

3、化铁；骨髓间充质干细胞；诱导分化；神经细胞山西医科大学硕士学位论文TheResearchofinducingBonemarrow—derivedmesenchymalstemcellsmarkedbySuperparamagneticironoxide(SPIO)todifferentiateintoneuralcellsinVitroAbstract0biectiveToresearchwhetherthereisanyeffectaboutit’scellularviability，pr01iferationanddifferentiationofneu

4、ralcellsafterbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)1abeledwithsuperparamagneticironoxide(SPIO)particlesandtodeterminethebestmarkingmethodandlaythefoundationforstemcellsinvivotracingstudy．MethodsUsingsuperparamagneticironoxidelabelingratsBMSCs，Prussianbluestainingforidentifying1abeli

5、ngindex，TaiPanbluestainingfordetectingthecellvitality，MTT(tetrazoliumblue)todetectproliferationactivityofstemcellslabeled．Toinducedstemcells1abeleddifferentiatingintonervecellsInvitrowith1mmol／LBMercaptoethanol(BME)andtheSerum—freeDMEMculture1iquid，Thenusingimmunohistochemistryto1a

6、yinducedcells，usingPrussianbluestainingidentifingtheironparticlesinnervecellsagain．ResultsThestemcellmarkedratewithPrussianbluestainingis95％ormore，thecellvitalityratewithTaiPanbluestainingis97％，MTTmethoddetectthatitisnotstatisticallysignificantforproliferationactivitybetweenlabeled

7、stemcellsandnotones．Majorityofbonemarrow—derivedmesenchymalstemcellsdifferentiateintoneuron一1ikecellsAfterinducingbyBME，immunohistochemistrywaspositive，usingPrussianbluestainingagainshowsironparticlesisinthenervece1lcytoplasm．ConclusionThereisnoeffectforsurvival，pr01iferationanddif

8、ferentiationtothenervecell