茎直黄芪中苦马豆素的提取与检测方法研究

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1、ByYangXianpengADissertationSubmittedtoUniversityofChineseAcademyofSciencesInpartialfulfillmentoftherequirementForthedegreeofMasterofScienceInstituteofModernPhysics，ChineseAcademyofSciencesAprils，2013关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属中国科学院近代物理研究所。本人完全了解中国科学院近代物理研究所有关保存、使用学位论文

2、的规定，同意研究所保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸制版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权中国科学院近代物理研究所可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离所后发表、使用学位论：之或与该论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为中国科学院近代物理研究所。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均己明确注明出处。除文中已经注明引用的内

3、容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：趟迸致谢本论文是在导师梁剑平研究员的悉心指导下于中国科学院近代物理所辐射药物研究中心以及中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点实验室完成的，在这里我要感谢中国科学院近代物理研究所的培养。在攻读硕士的三年期间，梁老师渊博的学识、创新的科研思路、严谨的治学态度以及对科研事业的热爱，对工作的全身心投入，都使我深受教益。梁老师一心为了学生，无微不至的关心和教育我们这些远离家乡的学子，帮助我们

4、顺利圆满的完成学业，成为合格的硕士毕业生，再次向导师表示由衷的感谢。在硕士论文实施过程中，得到了本办公室所有老师以及兰州畜牧与兽药研究所所有老师的帮助，是他们为我提供了良好的实验条件，为我解决了许多工作和学习上的困难，在他们身上我感受到了许多温暖。感谢郝宝成老师在我论文实施的全程给予的帮助和关心，感谢陆锡宏和王学红老师为实验提供的便利条件，感谢李雪虎老师、辛志君老师对我在学习过程中给予的指导，感谢周翔博士后、华兰英老师、刘宇老师和陶蕾老师的关心，感谢尚若锋老师、郭志廷老师、郭文柱老师和其他老师提供的各种帮助。感谢在同一实验室学习和工作过的各位师兄弟姐妹们，与

5、你们共同度过的时光愉快而难忘。感谢胡小艳、石广亮和薄永恒博士在科研思路上给予的帮助。感谢赵晓彬、王虹霞、毛晓芳和李贵玉硕士在仪器操作时给予的帮助，感谢强酷、陈慧、张铎同学在实验操作中给予的帮助，还要感谢陈申师弟、赵美荣师妹、王亮师弟、都文月师妹的帮助。感谢所有帮助过我的人，在这里一并感谢!最后感谢我的父母及家人，感谢他们三年来的支持和理解。谢谢!杨贤鹏2013年4月摘要在世界范围内，疯草是危害草原畜牧业最严重的一类毒草。茎直黄芪是疯草中的一种，在我国西藏地区广泛分布，对西藏地区畜牧经济造成巨大损失。苦马豆素是疯草中的主要毒性成分，除了引起牲畜中毒以外，还有着

6、很好的抗肿瘤和免疫刺激效果，吸引了国内外学者的广泛关注和研究。目前苦马豆素获取主要通过植物提取方法，提取率低，耗能高，需要改进苦马豆素现有提取方法，同时需要对苦马豆素的微量定量检测方法进行研究，以满足进一步对动物中毒机理以及抗肿瘤研究的需要。本文的研究工作建立了HPLC和GC两种茎直黄芪中苦马豆素分析方法，研究了微波和纤维素酶方法提取茎直黄芪中的苦马豆素，并采用正交试验优化获得了最佳提取工艺条件，同时建立了藏山羊血清中苦马豆素GC—MS分析方法。1、HPLC和GC两种茎直黄芪中苦马豆素分析方法的建立进样口温度为260。C，火焰离子化检测器(FID)温度为26

7、0。C，柱子初始温度为150。C，程序升温5。C／min(8分钟)，再程序升温30。C／min(2min)，载气为高纯氮气，流速为imL／min，进样量为1止的色谱条件下，以D一甘露醇(D-Manni．t01)为内标，在此条件下建立茎直黄芪中苦马豆素GC分析方法，测定茎直黄芪中苦马豆素含量为89．2±0．29mg／kg。色谱柱：ZORBAXEclipseXDB-C18(250mm×4．6mm，5岬)，流动相为乙腈-20mM磷酸二氢铵水溶液(PH=7．8)(2：98)，柱温为30。C，流速为0．8mL／min，检测波长为205nm，进样量为20此，在此条件下建

8、立茎直黄芪中苦马豆素HPLC分析方法，测定茎直黄芪中