连续液相萃取法提取豆类丝核菌培养液中苦马豆素-论文.pdf

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1、·6·AnimalHusbandry&VeterinaryMedicine2013Vo1．45No．1连续液相萃取法提取豆类丝核菌培养液中苦马豆素罗颉，杨鸣琦，郭良，刘宸铄(西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌712100)摘要：探索从豆类丝核菌培养液巾分离苦马豆素的有效方法。豆类丝核菌经改良的Czapeks培养液培养14d后，所得培养液经浓缩、超声波一水提法、三氯甲烷萃取及二氯甲烷连续液相萃取(60～70h)等一系列操作后，得到淡黄色粗品，粗品在90℃下减压升华得到白色晶体5mg。经薄层色谱法(FLC)和气相色谱法(GC)检测

2、其含有苦马豆素。确定使用连续液相萃取法可以从豆类丝核菌培养液中提取分离出苦马豆素。关键词：超声波一水提法；连续液相萃取法；豆类丝核菌；苦马豆素中图分类号：Q503文献标识码：A文章编号：0529—5130(2013)O1—0006—04ExtractionofswainsoninefromRhizoctonialguminicolaculturebythecontinuousliquid／liquidprocedureLUOJie，YANGMing—qi，GUOLiang，LIUChen—shuo(CollegeofVeteri

3、naryMedicine，NorthwestAgricultureandForestryUniversity，Yangling712100，China)Abstract：ThisexperimentisconductedtofindaneffectivemethodfortheextractionofswainsoninefromRhizoctonialeguminicolaculture．R．1eguminicolawereculturedonCzapekSmedium，andthec,ulturesupernathantwa

4、scollectedafter14d．Akindofstrawyellowcrudeswasobtainedusingtheultrasonic—waterextraction，chloroformextractionandcontinuousliquid／liquidextractionprocedurebydichloromethanefor60—70h．Then5mgofwhitecrystalswasfurtherObtainedbydecompressionat90cC．Theexistenceofswainsonin

5、ewasdemonstratedbythinlayerchromatography(TLC)andgaschromatography(GC)．ItsuggeststhatswainsoninecanbeextractedfromR．1eguminicolaculturebythecontinuousliquid／liquidextractionprocedure．Keywords：ultrasonic—waterextraction；continuousliquid／liquidextraction；Rhizoctonialeg

6、urninicola；swainsonine苦马豆素(swainsonine，SW)，即1，2，8一三羟明它作为化学治疗药物还有很大的前景J。西北农基吲哚兹定生物碱(1，2，8一trihydroxyindolizidine林科技大学与第四军医大学合作研制的以苦马豆素为alkaloid)，最早是由澳大利亚学者Colegate等从灰苦原料制成的抗癌药物“棘豆扶正胶囊”，在抗癌和抑马豆中分离出来的一种生物碱(Dorling，1978—1980；制肿瘤生长的临床治疗中也取得了较好的效果j。Colegate，1979)。它作为一种糖基化抑

7、制剂。，可以但是，苦马豆素的来源非常有限，植物中的含量很低，张黎等测定出豆类丝核菌次级代谢产物中苦抑制Or．一甘露糖苷酶Ⅱ在N一聚糖生物合成途径中的活马豆素含量要远远高于植物中的含量，但是从真菌中性，并且阻碍了复杂型寡聚糖的生成(Dorling，提取分离苦马豆素的过程相对繁琐，提取率不1980；Tulsiani，1982)。苦马豆素抗肿瘤的作用也已高¨。。因而，本研究通过探索连续液相萃取法对得到了验证。它不仅具有细胞毒性，可以抑制肿豆类丝核菌培养液中苦马豆素的提取工艺，以期寻找瘤细胞的新陈代谢J，降低化疗药物的毒性J，而到更为有

8、效的提取方法，为进一步研究提供参考。且还可以作为免疫调节剂(Humphries，1988；BOW一lin，1989)。尽管苦马豆素有副作用，但临床研究表1材料与方法1．1材料收稿日期：2012—05—09；修回日期：2012—10—15豆类丝核菌3．2871A，