以runx3为靶点干预内皮间质转分化的研究

《以runx3为靶点干预内皮间质转分化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：UDC：学号：406520512403南昌大学医学院硕士研究生学位论文以RUNX3为靶点干预内皮间质转分化的研究Researchoninhibitionofendothlial-mesenchymaltransitionbytargetingRUNX3曾明辉培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名、职称：李宾公副教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称：内科学（心血管内科）论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：评阅人：2015年6月学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在

2、导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入

3、有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业联系电话E_mail通信地址(邮编)：备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要

4、摘要目的1.观察转化生长因子-β1（TGF-β1）引起内皮细胞间质转分化及其与Runt相关性转录因子3（Runx3）的关系。2.观察Runx3对内皮间质转分化的影响。3.探讨Runx3影响血管内皮间质转分化的相关机制。方法1.将血管内皮细胞分组：①Control组：普通培养液培养血管内皮细胞6天；②1ng/ml组：含1ng/mlTGF-β1的普通培养液培养血管内皮细胞6天；③5ng/ml组：含5ng/mlTGF-β1的普通培养液培养血管内皮细胞6天；④10ng/ml组：含10ng/mlTGF-β1的普通培养液培养血管内皮细胞6天；

5、⑤10ng/ml+Runx3-siRNA病毒组：待病毒转染72小时后，再加含10ng/mlTGF-β1的普通培养液培养血管内皮细胞6天。2.应用qRT-PCR法分别测定各组细胞Runx3、血小板-内皮细胞粘附分子（CD31）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、SNAILmRNA的表达；Westernblot法测定各组细胞Runx3、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、SNAIL，（内皮型一氧化氮合酶）eNOS蛋白的表达并比较。同时运用ELISA检测试剂盒检验（血管内皮生长因子）VEGF。结果1.成功构建Runx3-siRNA慢病毒载体，

6、病毒感染72h，感染复数（MOI）=30时，病毒转染效率最强。2.qRT-PCR法检测各组细胞CD31mRNA、α-SMAmRNA、SNAILmRNA、Runx3mRNA表达，结果显示：与Control组相比，添加1ng/mlTGF-β1组血管内皮细胞CD31mRNA表达下调（P<0.05）、α-SMAmRNA表达上调（P<0.05）、SNAILmRNA表达上调（P<0.05）、Runx3mRNA表达上调（P<0.05）；添加5ng/mlTGF-β1组血管内皮细胞CD31mRNA表达下调（P<0.05）、α-SMAmRNA表达上调

7、（P<0.05）、SNAILmRNA表达上调（P<0.05）、Runx3mRNA表达上调（P<0.01）；添加10ng/mlTGF-β1组血管内皮细胞CD31mRNA表达下调（P<0.05）、α-SMAmRNA表达上调（P<0.05）、SNAILmRNA表达上调（P<0.01）、II摘要Runx3mRNA表达上调（P<0.01）。与10ng/mlTGF-β1组相比，添加Runx3-siRNA病毒相应组血管内皮细胞CD31mRNA表达上调（P<0.05）、α-SMAmRNA表达下调（P<0.05）、SNAILmRNA表达下调（P<0

8、.05）、Runx3mRNA表达下调（P<0.05）。3.Westernblot法检测各组细胞Runx3、SNAIL、eNOS、p-AKT蛋白表达，结果显示：与Control组相比，添加1ng/mlTGF-β1组血管内皮细胞Runx3表达上调（P<