一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用

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1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文麵_论文题目-氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用研究生姓名孙莹指导教师姓名王琛专业名称麻醉学研究方向心肌缺血再灌注损伤论文提交日期2015年3月本课题受江苏省自然科学基金（BK20141187），苏州市科技计划项目（SYS201473），苏州大学附属第二医院博士、留学归国人员预研项目（SDFEYBS1401），姑苏卫生人才项目资助一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用中文摘要一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用中文摘要目的：研究一

2、氧化氮（nitricoxide，NO）在七氟醚后处理减轻大鼠离体心肌缺血／再灌注自噬和凋亡中的作用。方法：取雄性SD大鼠建立Langendorff离体灌流模型，采用随机数字表法分为6组（n＝19）：假手术组（SHAM组）、单纯七氟醚组（SEVO组）、缺血再灌注组（I/R组）、七氟醚后处理组（SEVOP组）、七氟醚后处理＋非选择性一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase，NOS）抑制剂L-NAME组（SEVOP＋L组）、L-NAME组。除SHAM组、SEVO组平衡30min持续灌注2.5h外，余下4组平衡30min，缺血30min，再灌注2h。SEVO

3、组于第60min时灌注3%七氟醚15min。SEVOP组和L-NAME组于再灌注即刻分别给予3%七氟醚15min和L-NAME（100µmol/L）60min。SEVOP＋L组于再灌注即刻同时给予相同计量的七氟醚和L-NAME。再灌注2h结束后，采用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法计算心肌梗死范围，分光光度法测心肌组织NOS活性、硝酸还原酶法测NO含量，透射电镜观察自噬小体形成情况，WesternBlot技术检测蛋白（Beclin1、Bcl-2和Caspase-3）表达水平。结果：SEVO组与SHAM组各指标差异无统计学意义（P>0.05）；与SHAM组比较，I

4、/R组梗死范围增加，NOS活性、NO含量下降，Bcl-2表达下调，Beclin1、Caspase-3表达上调（P<0.05）。与I/R组比较，SEVOP组梗死范围减少，NOS活性增强，NO含量增加，Bcl-2表达上调，Beclin1、Caspase-3表达下调（P<0.05）。与SEVOP组比较，SEVOP＋L组梗死范围增加，NOS活性及NO含量下降，Bcl-2表达下调，Beclin1、Caspase-3表达上调（P<0.05）。I中文摘要一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用结论：七氟醚后处理减轻大鼠离体心肌缺血／再灌注损伤可能与其

5、增加NO含量，上调Bcl-2蛋白表达，从而抑制再灌注期间细胞自噬和凋亡有关。关键词：一氧化氮；自噬；细胞凋亡；麻醉药，吸入；心肌再灌注损伤作者：孙莹指导教师：王琛II一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用英文摘要Roleofnitricoxideinsevofluranepostconditioninginducedameliorationofischemia-reperfusionautophagyandapoptosisinisolatedrathearts.AbstractObjective:Todiscusstheroleof

6、nitricoxideinsevofluranepostconditioninginducedameliorationofautophagyandapoptosisinisolatedischemia/reperfusion(I/R)ratheartsMethods:MaleSprague-Dawleyratsheartswereisolated,linkedtoLangendorffperfusionapparatus，equallyandrandomlydividedinto6groups(n=19):SHAMgroup,SEVOgroup,I/Rgroup

7、,SEVOPgroup,SEVOP+Lgroup,L-NAMEgroup.WiththeexceptionofSHAMgroupandSEVOgroup,eachgroupwassubjectedtoocclusionfor30minfollowedbyreperfusionfor120min.InSEVOgroup,3%sevofluranewasadministeredatthesixthminuteofperfusionfor15min.3%sevofluraneandL-NAME(100µmol/L)wereadministeredattheonseto

8、freperfusion