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1、—－中图分类号：Ｑ９４３．２密级：公开讀＇匿；：？学校代码ｉｍｉｍ＿＿＿ｐ＾？ｆ＾守化ｆｆ批Ａ序ＨＥＢＥＩＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ．ＯＦＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕±学位论文转Ｌｅａ基因旱稻新材料的培育论文作者：刘青指导敎师：魏景芳教授副指导教师；’．申请学位类别：理学硕古学科、领域：植物学所在单位；生物科学与工程学院答辩日期：２０１５年５月巧北科技大学学位论文原创性声明，立进行研究工本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在
2、导师的指导下，独作所取得的成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：指导教师签名２。１＾年今月Ｈ之。化年备月曰口＾Ｖ，巧北科技大学学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北科技大学可Ｗ将本学位论
3、文的全部或部分内容编入有关数据库进行检。索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文□保密，在年解密后适用本授权书。＿＿本学位论文属于它ｆ不保密。＂＂（Ｖ请在１＾上方框内打）学位论文作者签名；指导教师签社＾＇方／户年４月曰对／ｓ年令月曰ClassifiedIndex：Q943.2SecrecyRate：PublicizedUDC：580UniversityCode：10082HebeiUniversityofScienceandTechnologyDissertationfortheMas
4、terDegreeToCultivateTransgenicLeaGeneUplandRiceCandidate：LiuQingSupervisor:Prof.WeiJingfangAssociateSupervisor：AcademicDegreeApppliedfor：MasterofScienceSpeciality：BotanyEmployer：CollegeofBiologicalScienceandEngineeringDateofOralExamination:May,2015摘要近年来,全球水资源短缺已成为限制农业,工业
5、,及人类生活发展的一大影响因素,而依靠发展旱作农业成为解决水源资源短缺问题的关键。旱稻是水稻的一个品种在粮食作物中占非常重要的地位，需水量少,抗旱性强,与水稻相比有许多优点,是推行旱作农业最佳的粮食作物之一。旱稻解决了水稻种植时土壤干旱的问题，大大降低了农业生产成本，从而可以代替水稻进行大面积种植。本研究选用“鲲旱一号”这个品种作为实验材料,利用农杆菌转化法和基因枪法将bar基因和lea基因转入“鲲旱一号”愈伤组织中,研究了基因枪转化时各轰击参数以及农杆菌侵染时菌液浓度等因素对转化的影响，对T2代转基因植株进行植物生理学鉴定，建立了一个
6、高效完善的转化体系和鉴定体系，培育出抗旱抗盐抗除草剂旱稻新品种纯合体植株。实验结果表明最适宜的愈伤诱导培养基为NB+2,4-D(不加脯氨酸)，糖源为麦芽糖，最佳菌液侵染浓度OD600值为0.2，筛选培养基中除草剂最佳浓度为40mg/L，挑取乳白色抗性愈伤组织经过5d左右的预分化培养，可以提高其分化效率。本实验对T0代转基因水稻进行PCR检测，统计结果，利用优化后的转化体系可将转化率提高到37.15%。对T2代植株叶片喷洒0.8mg/ml的除草剂，若同一株系里所有植株表现出除草剂抗性，对抗性植株进行PCR检测，挑选纯合体。对纯合体植株进行
7、抗旱抗盐鉴定，在中度干旱胁迫时转化苗长势明显优于非转苗；盐胁迫浓度为0.75%时，转化苗与非转化苗生长差距最大。关键词旱稻；除草剂；农杆菌；PCR；Lea基因；转基因植株IAbstractInrecentyears,theglobalshortageofwaterresourceshasproducedabiginfluence,whichwillrestrictthedevelopmentofagriculture,industry,andhumanlife,sodevelopingdrylandfarmingisthekeytoso
8、lvethewatershortageproblem.Uplandrice,akindofrice,accountsforaverysignificantpositioninfoodcrops,andupl
