血管紧张素ⅱ诱导h9c2心肌细胞肥大模型的建立及泛素化结蛋白水平的变化

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1、分类号：密级：UDC：学号：416522612682南昌大学专业学位研究生学位论文血管紧张素II诱导H9c2心肌细胞肥大模型的建立及泛素化结蛋白水平的变化EstablishmentofcardiomyocytehypertrophyinducedbyangiotensinIIinH9c2myocardialcelllineandchangesinubiquitinatedDesminlevels杨超兴培养单位（院、系）：赣南医学院第一附属医院指导教师姓名、职称：廖伟教授专业学位种类：医学专业领域名称：内科学（心血管）论文答辩日期：2015年5月答辩委员会主席：评阅人

2、：2015年5月学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以

3、将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：建立血管紧张素II诱导

4、H9c2心肌细胞肥大模型，并观察各组心肌细胞泛素化蛋白水平的变化。方法：血管紧张素II诱导H9c2心肌细胞肥大模型建立：H9c2心肌细胞在含10%FBS的高糖DMEM培养基中培养48h，消化传代后，分别以3个AngII浓度组（10-8、10-7、10-6mol/L）分别处理不同时间（0、6、12、24、48、72h），另设一个空白对照组；BCA法测量其总蛋白含量；并测量相同面积下心肌细胞数，计算心肌细胞相对表面积。观察泛素化结蛋白水平的变化。常规传代培养H9c2心肌细胞，分别以4个AngII浓度组（0、10-8、10-7、10-6mol/L）分别处理不同时间（0、6

5、、12、24、48、72h），Westernblot法及免疫组织化学法检测泛素化结蛋白的表达情况。结果用x±S.E.M表示，用SPSS14.0软件进行统计学处理，两组数据比较统计学分析采用两个独立样本的t检验。结果：AngII呈时间和浓度依赖关系地诱导H9c2心肌细胞肥大，表现为细胞总蛋白含量、细胞相对表面积、相同面积下的细胞数和泛素化结蛋白表达均较对照组显著增多（P<0.05），且以10-7mol/L作用48h最为显著。结论：10-7mol/LAngII诱导H9c2心肌细胞48h后成功建立心肌细胞肥大模型，且H9c2心肌细胞肥大后，泛素化结蛋白也明显升高。关键词

6、：H9c2心肌细胞；泛素化结蛋白；血管紧张素IIIIAbstractABSTRACTObjective：EstablishmentthemodelofangiotensinIIinducingcardiomyocytehypertrophyinH9c2myocardialcell,andobservingthechangesofjunctionproteinubiquitinationlevel.Methods：UseangiotensinIItoinducecardiomyocytehypertrophyinH9c2myocardialcell;Culturedi

7、nhighglucoseDMEMmediumcontaining10%FBSfor48h,thenisolatedandsubcultured.TheyweredividedintothreeAngIIconcentrationgroups(10-8,10-7,10-6mol/L)thatweredealtwithindifferenthours(0,6,12,24,48,72h),andthereisalsoacontrolgroup;measuredthetotalproteincontentuseBCA,measuredthenumberofcardiom