转trkc神经干细胞联合胶原支架对创伤性脑损伤大鼠模型治疗作用的实验研究

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1、＂４也＾皆ｆ促，京碱中＠聲５钟《獻硕±研究生学位论文ｗｍＪｗ＂－：北京协和医学院研究生院学校代码：１００２３学号：Ｓ２０１２００１０５０硕±学位论文（专业学位）转ＴｒｋＣ神经干细胞联合胶原支架巧创伤性脑损伤大鼠模型治巧作用的实验硏究所院：北京协和医院姓名：周强意指导教师：马文斌教授导师小组：王任直教授包新杰大夫学科专业：外科学研巧方向：烦脑损伤神经再生修复治疗完成日期：２０１５年４月目录Ｓ录１一．．．．２第部分：

2、巧ＴｒｋＣ神经干细胞联合胶原支架巧创伤性脑损伤大鼠模型治挖作用的实验研究．．．．．２中錢要ＡＢＳＴＲＡＣＴ４前Ｓ６７材料与方法－７１欄２皮１０．贵１６结Ｓ１．转ＴｒｋＣ基因神经干细胞转染复数ＭＯＩ１６２．ＴｒｋＣ基因在ＮＳＣｓ中的表达１６．ＮＳＣ＋１７３ｓｃｏｌｌａｇｅｎ体外共培养鉴定４．行为学评分１８５－．ＭｉｃｒｏＰ打１９－ＭＲ６．ＭｉｃｒｏＩ２０７２０．免疫姐化２３２３１．胶原支架与干细胞移植

3、２－．ＮＴ３与神经２３干细胞移植３．移植方式与时机２４４．对行为学评分及代谢的影响２４结论２４２５参考雄２７第二部分：树状突细胞为基础的主动免疫挖法治挖胶质巧细胞瘤的系统综述２７中舖要ＡＢＳＴＲＡＣＴ之８２９前ｇ材料骑＆２９１．检索策略巧２．纳入及排除标准３０３０３．疗效及副反应判定指标结＾３０１．纳入文献３０．３０２临床研究特点３．治疗效果评估３１４．安全性及并发症３１３２疑

4、英文缩略词５０英文缩略词５１３願５－１－一第部分：转ＴｒｋＣ神经干细胞联合胶原支架巧创伤性脑损伤大鼠模型治巧作用的实验研究中文摘要硏巧背景和目的外伤性脑损伤（ｔｒａｕｍａｔｉｃｂｒａｉｎｕｒｙＩ），耐，ＴＢ会造成严重的神经系统功能障碍目前仍没有有效的临床治疗能逆转ＴＢＩ病理进程。近年来很多临床前研究表明干细胞移植治疗一在动物ＴＢ－Ｉ中显示出良好的效果。另些研究认为ＮＴ３和生物支架能促进神经干细胞增殖及神经元分化－。本研巧尝试用神经干细胞联合结合ＮＴ３的胶原

5、材料治疗中度ＴＢＩ大鼠，重点验证干细胞及胶原材料联合移植的可行性，并观察神经干细胞在体内增殖和分化成神经元的情况。方法ＦｅｅｎＩ成年雄性ＳＤ大鼠，体重２５０ｇ，用巧自由落体打击法造成中度ＴＢ。将大鼠随机分成四组－－－ｃｏａｅ组ＮＳＣ姐理：①ＴｒｋＣＮＳＣ＋ＮＴ３ｌｌｇＮＳＧ＋ｃｏｌｌａｅ组；；②ｇ③；④生盐水组，每组６只大鼠。术后第７天移植神经干细胞和胶原支架至大鼠脑损伤化。用改良神经功能缺失评分（ｍＮＳ巧评价各组大鼠干细胞移植后１、７、１４、２１及２８ｄ的行为学表现Ｉ

6、ｄ２８ｄｃｒｏ－ＰＥＴ评估损伤灶代谢情。细胞移植前Ｗ及细胞移植后行ｍｉ２ｄ植后２７ｄ行ｍ－况；细胞移植前Ｗ及细胞移ｉｃｒｏＭＲＩ评估硕内结构；移植后２周行ａｘ／ｂｃ－－Ｉ免疫组化ＧＦＰ／ｂｌ２／ｎｅｓｔｉｎ／ｋｉ６７／阳Ｔｕｂｕｌｉｎ。结果（１）ＴｒｋＣ基因重组腺病毒转染神经干细胞ＮＳＣ句的最适宜感染复数为１００转ＴｒｋＣ（；神经干细胞在体外ＴｒｋＣ基因明显过表达。（２）神经干细胞同胶原支架在体外共培养５山巧光显微镜及扫描电镜均显示神经干细胞同胶原支架附着良好，细胞间有

7、突起连接。－－Ｔ－牛（３）在细胞移植１４Ｗ后／ｒｋＣＮＳＣｓ＋ＮＴ３ｃｏｌｌａｇｅｎ组和ＮＳＣｓｃｏｌｌａｇｅ组行为学评－２－－－－分（ｍＮＳＳ）均比对照沮明显低＜０．０５ＴｒｋＣＮＳＣｓ＋ＮＴ３ｃｏｌｌａｅｎＮＳＣｓ＋ｃｏｌｌａｅ（ｐ），ｇ组和ｇ组之间评分无统计学差异（＞０。ｐ．０５）－－－（４）大鼠脑外伤后４周，各组损伤吐代谢活性均降低，ＴｒｋＣＮＳＣｓ＋ＮＴ３ｃｏｌｌａｇｅｎ纽损伤灶代谢活性最高。而ＮＳＣｓ＋ｃｏｌｌａｇｅ组损伤灶代谢活性也明显较对照组／单纯Ｎ

8、ＳＣｓ组高（ｐ＜０．０５。）５ＴｒｋＣ－ＮＳＣ－３－ｃｏ（）免疫组化结果；ｓ＋ＮＴｌｌａｇｅｎ组畑Ｐ主要分布在损伤化及周围中，－－ｒ－ｓ＋－－ｃｏ小部分向脑深部迁移ＴｋＣＮＳＣＮＴ３ｌｌａｅｎ组损伤灶周围ｂｃｌ２／ｎｅｓｔｉｎ／ｋｉ６７／ｉＩＩ；ｇｐＴｕｂｕｌｉｎ等染色阳性率均比对照组多。结论ｒｋＣ－ｓ＋ＮＴ－３－ｃｏｅｎ实验论证了ＴＮＳＣｌｌａｇ在体外培养的可行性。对于遭受中度Ｔ