副猪嗜血杆菌分型血清的制备及四川地区血清流行病学调查

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3、染病＿＊＇■＞７Ｖ一＇一’；、＇、；卡．＊－Ｃ．Ｉ？？＊：■：２０巧年６／月’、？ｒ＊？－－、ｆ．．，．＾．＇－，．、－－■－‘．．？’ＶＶ，■？？？？－．．．．‘一、‘：二才＇＇，．．本研究受下列基金项目资助特此表示感谢公益性行业（农业）科研专项（项目编号：ＮＯ．２０１３０３０３４）ｓｓｕｏｒｅｄＳｉ－Ｔｈｉｓｗｏｒｋｗａｔｂｙｅｃａｌ

4、Ｆｕｎｄｆｏｒ乂ｒｏｓｃｉｅｎｔｉ打ＣｐｐｐｇＲｅｓｅａｒｃｈｉｎ化ｅＰｕｂｌｉｃＩｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎｏ．２０１３０３０３４）论文独削性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示

5、了谢意。研究生签名：《心。年６月方日关于论文使用授巧的声明、目：本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定，Ｐ学校有权保留，并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。曰＾论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＂＂（请在Ｗ上ｎ内划Ｖ）（研究生签名：為ｃｂｎＳ年＾月日７导师签名），年月日

6、〇〇户＾１＾中文摘要副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌一种（片ＨＰＳ）引起猪的。接触性细菌性传染病，严重威胁着养猪业的健康发展长期ｙｉ■来，ＨＰＳ血清型复杂，分型血清制备较困难，方法不标准，为有利于本病的病原学诊断，本试验采用ＨＰＳ的１５个血清型标准菌株制备免疫原免疫健康雄性家兔，成功制备ＨＰＳ分型血清，并选用琼脂扩散试验对四川地区ＨＰＳ田间分离株进行血清型鉴定，旨在从病原学角度对四川地区ＨＰＳ优势血清型的流行情况Ｗ及血清型的分布规律进行调査，为四川地区该病的针对性防控提供

7、科学依据。１．ＨＰＳ分型血清制备的免疫程序的优化筛选从澳大利亚昆±兰州动物研巧所购买ＨＰＳ的１５个血清型的标准菌株，对标准菌一株进行复苏与鉴定，进步证实标准菌株的准确性，为分型血清的制备奠定基础。通过对本实验室原有免疫程序进行优化，优化后的免疫程序提高了菌液免疫次数，缩短了免疫间隔时间，降低了免疫剂量，同时基础免疫之前增加了免疫诱导。采用优化后的免疫程序进行ＨＰＳ５型分型血清的制备，同时Ｗ文献报道的３种不同的免疫程序作为对照组，免疫结束后也脏采血，并分离血清，对血清采用琼脂

8、扩散试验进行特异性，采用阻Ａ试剂盒进行抗体效价检测：血，检测。结果表明清特异性良好试验组与对照组家兔血清通过琼脂扩散试验均能产生明显沉淀线，空白对照组琼脂扩散试验未产生沉淀线，并且试验组血清抗体效价达１；３２，均高于３个对照组，，因此优化后的免疫程序可推广用于ＨＰＳ其它血清型分型血清的制备。２．ＨＰＳ分型血清的制备及其临床应用利用ＨＰＳ的１５个血清型的标准菌株制备免疫原，采用优化后的免疫程序通过皮、下注射与耳缘静脉注射免疫原