高度保守的rna结合蛋白-pumilio在小鼠精子发生中作用的研究

高度保守的rna结合蛋白-pumilio在小鼠精子发生中作用的研究

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1、分类号:R3单位代码:10312110密级:学号:20297[|]南乐乏种夫掌硕±学位论文题目-Pumilio在小:高度保守的RM结合蛋白ft精子发生中作用的巧究研究生:朱巧指导教师:徐字是教授—学科专业:生殖医学学院名称:生殖医学国家重点实验室完成时间二0—五年五月:?南京医科大学硕±学位论文分类号:R3单位代码:10312202密级:学号:11097藝南系S种夫掌硕:t学位论文-Pum题目:高度保守的RNA结合蛋白ilio在小贏精子发生中作用的研究;朱形研究生

2、指导教师:徐字君教授学科专业:生殖医学学院名称:生殖医学国家重点实验窒二—五年五月完成时间:0南京医科大学硕±学位论文南京医科大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下,独立进行研巧工作所取得的成果。除了文中特别加W标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名;日期;>皆年^月八日麥导师签名日親?皆年/月/诚又学位论文版权使用授权书本学

3、位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权南京医科大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。""本学位论文属于(请在下相应方框内打V);1、保密□,在年解密后适用本授权书。__2、不保密D。作者签名;日期:^月/旧半躬导师签名;日期:年月/巧南京医科大学硕±学位论文目录1.中文摘要12.英文摘要33.政53.1前言53.2实验材料与方法8

4、3.2.1实验材料83.2.2实验方法113.2实验结果263.2.1Pum家族蛋白在睾丸中表达和分布263.2.2Pum家族蛋白在精子发生中作用303.3.分析与讨论513.4参考文献544.综述565覆谢73南京医科大学硕±学位论文RNA-Pum高度保守的结合蛋白iIio在小鼠精子发生中作用的研究中文摘要一一精子发生的过程是个复杂的发育过程,这过程叛及精原干细胞和精原细胞有丝分裂,然后分化为精母细胞进行减数分裂,最终形成成熟的精子,因此精子发生为研究发育分化过程中的基因表达的调控提

5、供了一个很好的模型,在精子分化的过程中涉及基因组染色质的高度浓缩,从而导致该阶段基因组不能作为模板转录mRNA,因此在精子分化的过程中不能起始新的转录,这就需要有些mRNA提前转录并稳定的储存在细脑内,待特定的阶段起始翻译,RNA结合蛋白在mRNA从合成、储存、翻译到降解的过程中起到了关键的作用一,在生殖细胞中有高表达量的RNA结合蛋白可能参与完成这转录后事件,因为多个在动物界包括人的精子发生中高度保守的蛋白几乎都是RNA结合蛋白,因此精子发生中的这种转录后调控机制很可能是高度保守的,但RNA结合蛋白是如何参与精子发生的调控的,尤其是在小鼠和人的精子

6、发生中了解甚少。一PUF蛋白(Pumilioand甜F)代表个真核生物中广泛存在的RNA结合蛋白家族,PUF家族蛋白W出现典型的8个连续的PC/F重复序列为标志,每个PUF序列的长度大约为40个氨基酸-,PW重复序列的两端出现相关序列一Cspl和Csp2,整个PUF重复序列是结合RNA所必须的。PUF蛋白作为个RNA结合蛋白家族,己有证据盈示其在秀丽隐杆线虫和果魄参与生殖细胞分化和发育的过程,而斯m舶i伊ww/j和戶《7/2舶化》2乃作为小鼠中两个PUF蛋白家(族的成员在小鼠精子分化过程中的作用还有待研究。在前期的研巧工作中,本实验室确认了戶和

7、在睾丸组织中都有较高表达,户的mRNA在小鼠出生后3天精子发育的初期就可检测到表达,在14天到28天左右表达都有逐渐升高的趋势,,在精子发生中1南京医科大学硕±学位论文Puml和Pum2的蛋白都在支持细胞、精原细胞、精母细胞的细胞质中表达,在圆形精子和成熟精子中不表达。由于无论是fww/单独敲除还是尸wn2单独敲除,小鼠都是可育的,提示A/wJ和Aw政可能有相互补偿作用,因此研究化m家族的作用有必要建立同时敲7w政的双敲小鼠。但全

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