冷诱导RNA结合蛋白在亚低温下的神经保护作用研究.pdf

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1、中华老年心脑血管瘸杂志20l4年7月第16卷第7期ChinJGeriatrHearlBrainVesselDis，Jul2014，Vol16，No．7基础研究．冷诱导RNA结合蛋白在亚低温下的神经保护作用研究蔡英，郑君毅，王冠，武俏丽，巫嘉陵，苏摘要：目的研究亚低温下冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对受损海马神经元的保护作用机制。方法将原代培养的海马神经元分为3组：对照组、损伤组和治疗组。氧糖剥夺55min制作海马神经元损伤模型，损伤组和治疗组在氧糖剥夺55min后分别置于37℃和32。C培养24h。收集各组细胞，MTT检测各组细胞的存活率，荧光定量PCR和W

2、esternblot检测CIRP的rnRNA和蛋白的表达水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Westernblot检测Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较，损伤组细胞生存率明显下降[(43．3±8．1)vs(100．0_4-12．7)，P<0．05]，治疗组细胞生存率明显升高[(71．8±13．6)-us(43．3±8．1)，P<0．051，与损伤组比较，治疗组细胞凋亡率下降[(19．5±0．6)vs(30．7±2．5)]，CIRP的mRNA蛋白表达明显升高，Caspase一3蛋白表达水平降低，差异有统计学意义(P<0．05)。结论亚低温下CIRP

3、表达水平升高，通过抑制细胞凋亡发挥神经元保护作用，是亚低温脑保护作用途径之一。关键词：低温；RNA结合蛋白质类；海马；神经元；细胞凋亡Roleofcold_inducibleRNAbindingproteininprotectionofneuronsunderhypothermiaCAIYing，ZHEGNJun—yi，WANGGuan，etal(TianjinHuanhuHospital，TianjinNeurosurgeryInstitute。TianjinCerebrovascularandNeurodegenerativeKeyLaboratory，T

4、ianjin300060，China)Abstract：0bjectiveTostudytheroleofcold—inducibleRNAbindingprotein(CIRP)inprotectionofinjuredhippocampalneuronsunderhypothermia．MethodsPrimarilycuhuredhippocampalneuronsweredividedintocontrolgroup，injurygroupandtreatmentgroup．Amodelofinjuredhippocampalneuronswasest

5、ablishedbydeprivingoxygenglucosefor55rain．Thehippocampalneuronsininjurygroupandtreatmentgroupwereculturedfor24hat37。Cand32。Cafterdepri—vingoxygenglucosefor55rain．ThecellsurvivalrateindifferentgroupswasassayedbyMTT．TheCIRPmRNAandproteinexpressionsweredetectedbyRT—PCRandWesternblot，re

6、spec—tively．Theapoptosisrateindifferentgroupswasmeasuredbyflowcytometry．ResultsThecellsurvivalratewassignificantlylowerininjurygroupthanincontrolgroupandintreatmentgroupthanininjurygroup，andsignificantlyhigherintreatmentgroupthanincontrolgroup(43．3±8．1vs100．0±12．7V0，P<0．05；19．5±o．6v

7、s30．7±2．5，P<0．05；71．8±13．6,us43．3％±8．1，P<0．05)．TheCIRPmRNAandproteinexpressionleve1sweresignif~一cantlyhigherwhiletheCaspase一3expressionlevelwassignificantlylowerintreatmentgroupthanininjuredgroup(P<0．05)．ConclusionThehighCIRPexpressionlevelunderhypothermiacanprotectinjuredhippocampa

8、lneuronsbyinhibitin