和田胡杨林土壤放线菌分离、鉴定及次生代谢产物研究

《和田胡杨林土壤放线菌分离、鉴定及次生代谢产物研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、塔里木大学硕士学位论文和田胡杨林土壤放线菌分离、鉴定及次生代谢产物研究IsolationandidentificationofactinomycetefromthesoilofPopuluseuphraticaforestinHotanandstudiesonitssecondarymetabolites研究生：孙勇指导教师：张利莉教授万传星教授专业：生物化学与分子生物学研究方向：极端环境微生物及其基因资源研究获得学位名称：理学硕士获得学位时间：2015年6月日塔里木大学生命科学学院二〇一五年六月和田地区胡杨林土壤放线菌分离、鉴定及次生代谢产物研究摘要和田地区位于新疆维吾尔自治

2、区最南端，其地理位置特殊，孕育了较为独特的生态系统，在此生态环境中存在着具有沙漠英雄美誉的原始胡杨林；胡杨林地处干旱、缺水、高温、高辐射的环境中，其土壤中可能蕴藏的较为特殊的微生物群落，因此本研究以新疆和田地区胡杨林土壤作为研究材料，对此环境中的放线菌资源进行研究，以期发现较为原始和独特的放线菌物种资源；同时在此资源中寻找有价值的放线菌菌种，对其代谢产物种类和功能进行研究探索。1.土壤放线菌分离鉴定及拮抗菌株筛选以采自新疆和田地区胡杨林11个采集点的土壤混合样品为研究材料，使用10种本实验室的经典培养基分离获得108株隶属于3个属38个种的放线菌。分别为链霉菌属（Strepto

3、myces）糖丝菌属（Saccharothrix）和诺卡氏菌属（Nocardiopsis），其中链霉菌属为优势放线菌类群，涵盖35个种。对分离鉴定的38个种的放线菌菌株以革兰氏阳性（金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus、表皮葡萄球菌Staphylococcusepidermidis）、革兰氏阴性（大肠杆菌Escherichiacoli）病原菌，人体病原真菌（白色念珠菌Candidaalbicans）、农业病原真菌（棉花枯萎病原真菌Fusariumoxysporumf.sp.Vasinfectum）、棉花黄萎病原真菌(Verticilliumdahliae)、红

4、枣黑斑病原真菌（AlternariaalternateKeissle）为靶标菌进行拮抗菌株筛选，最终获得有18株菌株具有抑菌效果，其中1株菌株对金黄色葡萄球菌有抑制效果的，9株菌株对表皮葡萄球菌有抑制效果；4株菌株对白色念珠菌有抑制效果；2株菌株对红枣黑斑病原真菌存在抑制作用；没有获得对大肠杆菌和棉花枯萎病、黄萎病原真菌有抑菌作用的菌株。2.胡杨林土壤潜在新种TRM43006多相分类研究通过形态特征、生理生化的特征、全细胞化学特征以及基因型特征等多相分类方法，对分离于和田地区胡杨林土壤放线菌TRM43006进行分类鉴定，最终确定菌株TRM43006为链霉菌属中的一个新种，将其命

5、名为产吲哚链霉菌（Streptomycesindologenes）。3.胡杨林放线菌TRM43006次生代谢产物分离鉴定对具有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌抗菌活性的放线菌新物种TRM43006进行了次生代谢产物研究。应用大孔树脂富集、薄层色谱、硅胶柱色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱等方法对该菌株代谢产物进行分离纯化，获得3个化合物。通过1D&2DNMR波谱数据分析，鉴定化合物结构分别为β-羰基-3-吲哚-丙醛（1）、邻苯二甲酸二（2-乙基）已酯（2）、13-甲基肉豆蔻酸（3），其中13-甲基肉豆蔻酸对表皮葡萄球菌生物膜形成具有较强抑制作用。关键词：胡杨林；放线菌；多相

6、分类；次生代谢产物；分离鉴定；IsolationandidentificationofactinomycetefromthesoilofPopuluseuphraticaforestinHotanandstudiesonitssecondarymetabolitesAbstractHotanisacitylocatedinthesouthernmostpartofXinjiangprovince,whosespecialgeographicallocationgivesbirthtothespecialecologicalsystem.Spontaneouslythereisa

7、famousprimitivepoplardesertforestecosystemgrowingintheenvironment,whichisunderthoseconditions:scarcity,hightemperature,droughtandhighradiation.Therecontainspecialmicrobialcommunitiesinthesoil.Thus,thisarticledoessomeresearchesonActinomycetesresourc