PLK1 PBD靶向抗肿瘤抑制剂的筛选及活性研究

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1、０２２８学校代码：１７５？学号：画４硕士学位论文（学术型硕士学位论文）ＰＬＫ１ＰＢＤ靶向抗肿瘤抑制剂的筛选及活性研究－ＳＣＲＥＥＮＩＮＧＡＮＤＡＮＴＩＴＵＭＯＲＡＣＴＩＶＩＴＹＯＦＰＬＫ１ＰＢＤＴＡＲＧＥＴＥＤＩＮＨＩＢＩＴＯＲＳ专业：药物分析学研究生：宗可昕导师：范卓文教授中减人孝二Ｏ—六年六月黑龙江中医药大学硕士学位论文目录英汉缩略语对照表１中文摘要３ＡＢＳＴＲＡＣＴ４弓６Ｉｓ一第章文献综述８１月帽８２保

2、罗样激酶ＰＬＫ１与肿瘤９３蛋白纯化技术１０４ＰＬＫ１ＰＢＤ结构及功能１１５荧光高通量筛选方法１３６ＰＬＫ１ＰＢＤ小分子抑制剂１５７展望１７第二章细胞培养与ＰＬＫ１ＰＢＤ的分离纯化１９１实验材料１９１．１质粒、菌株与细胞株１９１．２主要试剂１９１．３主要溶液１９４２１１．主要仪器２实验方法２１２１２１．细胞复苏和传代２－．２２８ａ＋ｐＥＴ质粒的酶切反应２２（）２．３ＰＬＫ１ＰＢＤ重组蛋白的表达２３２．４ＰＬＫ１ＰＢＤ

3、重组蛋白的分离纯化２３２．５目的蛋白的浓度测定２４３錢雜２５３．１细胞培养２５－－３．２Ｔ２８ａＰＬＫｌＰＢＤ重组质粒的酶切鉴定ｐＥ２５．ＰＬＫ１ＰＢＤ重组蛋白的可溶性表达与分离纯化２５３３＇３．４甫组蛋丨丨浓度的测定２６ＩＩ黑龙江中医药大学硕士学位论文４ｉｔｉｔ２６５２７第三章化合物在荧光偏振模型上的筛选２８１实验材料２８１．１主要试剂２８１２２８．主要溶液１２８．３主要仪器２８２实验方法２．１样品库中化合物的稀释

4、２８２．２荧光偏振模型上初筛化合物２８２．３荧光偏振模型上复筛化合物及ＩＣ５Ｇ值的确定２９３ｇ２９雜ｍ３．１荧光偏振模型上筛选的结果２９３．２化合物１０９７Ｇ１１和６５０７Ｇ１１在ＰＬＫ１ＰＢＤ上的活性３０４３１／、５£３１Ｊ第四章小分子抑制剂１０９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１１的抗肿瘤机制研究３２１实验材料３２３２１．１主要试剂１．２主要溶液３２１．３仪器３２２实验方法３２２．１ＭＴＴ比色实验３２２２．流式细胞仪检测小分子抑制剂１０

5、９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１１对细胞凋ｔ麟卩向３３４２．３流式细胞仪检测细胞周期阻滞３２．４小分子抑制剂１０９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１１对细胞迁移的影响３５２１０９７１５０７．５小分子抑制剂Ｃ１和６Ｇ１１与ＰＬＫ１激酶ＰＢＤ结构域３６的分子对接３实验结果３６ｍ黑龙江中医药大学硕士学位论文＿３．１小分子抑制剂１０９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１１的细胞毒性（ＭＴＴ比色法）３６３１０９Ｃ１０７．２流式细胞仪检测小分子抑制剂７１和６５Ｇ１１对细胞凋ｔ３８３１．３流式细胞仪检测小分

6、子抑制剂０９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１１对细胞周期影响的结果４１３．４小分子抑１０９７Ｃ１１和６５０７Ｇ１．４６制剂１对细胞迁移的影响结果３．５化合物与ＰＬＫ１ＰＢＤ对接５０４５４５賤５５６５参考文献５７賴６５攻读学位期间发表的论文６６－觀性Ｍ６７学位论文授权使用授权书６８６９ＩＶ黑龙江中医药大学硕士学位论文英汉缩略语对照表缩写英文名称中文名称ＡｍｐＡｍｐｉｃｉｌｌｉｎ氨节青霉素ＡＰＡｍｍｏｎｉｕｍｐｅｒｓｕｌｆａｔ

7、ｅ过硫酸铵ＢＣＡＢｉｃｉｎｃｈｏｎｉｎｉｃａｃｉｄ二喹啉甲酸ＢＳＡＢｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ牛血清白蛋白ＤＭＳＯＤｉｍｅｔｈｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ二甲基亚砜ｙＥＤＴＡＥｈｔｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｏｔｅｔｒｅｃｅｔｉｃａｃｉｄ乙二胺四乙酸二钠盐ＦＦｒｅｓｃｅｎｃｅ－ａｃＡＣＳｌｕｏｔｉｖａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ流式细胞术ＦＰＦｌｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｏａｒｉｚａｔｉｏｎ焚光偏振ｐ－Ｆ－－ＩＴＣＦｕｏｒｅｉｎｉｓｏｔｔｅ５ｌｓｃｅ５ｈｉｏｃｙ

8、ａｎａ异硫氰＊酸焚光素－－ｒａｅｈｓ－－ＧＡＰＤＨｇｌｙｃｅｌｄｙｄｅ３ｐｈｏｐｈａｔｅ甘油醛３磷酸脱氢酶ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＨｉｓＨｉｓｔｉｄｉｎｅ组氨酸ＨＲＰＨｏｒｓｅｒａｄｉｓｈｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｅｎｚｙｍｅ辣根过氧