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时间:2019-03-09
《低氧诱导肾上腺髓质素对卵巢癌细胞及在体肿瘤的生长促进作用研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、温州医科大学硕士学位论文分类号:R71单位代码:10343学号:2010090032同等学力申请硕士学位论文论文题目:低氧诱导肾上腺髓质素对卵巢癌细胞及在体肿瘤的生长促进作用研究研究生姓名:周美芳学科专业:妇产科学类型:学术型指导教师:吕杰强二O一八年五月温州医科大学硕士学位论文论文题目:低氧诱导肾上腺髓质素对卵巢癌细胞及在体肿瘤的生长促进作用研究答辩委员会主席:王世宣教授华中科技大学同济医学院附属同济医院答辩委员会成员:朱雪琼教授温州医科大学附属第二医院陈浩林教授温州医科大学附属第二医院许张晔教授温州医科大
2、学附属第二医院王繁副教授温州医科大学附属第二医院论文答辩日期:2018年5月7日温州医科大学硕士学位论文目录一、缩略词表……………………………………………………………1二、摘要1、中文摘要……………………………………………………………22、英文摘要……………………………………………………………5三、论文正文1、前言…………………………………………………………………82、材料与方法…………………………………………………………93、结果…………………………………………………………………134、讨论……………………
3、……………………………………………195、结论…………………………………………………………………236、参考文献……………………………………………………………24四、附录…………………………………………………………………26五、致谢…………………………………………………………………27六、综述综述正文………………………………………………………………28参考文献………………………………………………………………33七、学位论文独创性声明……………………………………………36八、关于学位论文使用授权声明………………
4、………………………36温州医科大学硕士学位论文略缩词表英文缩写英文全称中文全称ADMAdrenomedullin肾上腺髓质素VEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子HIF-1hyPoxia-induciblefactor-1低氧诱导因子1HREhyPoxiaresPonsiveelement缺氧反应原件MAPKsmitogen-activatedProteinkinases丝裂原激活的蛋白激酶PKCProteinkinaseC蛋白激酶CPIK3CPhosPhati
5、dylinositol-3kinase磷脂酰肌醇-3激酶DMSODimethylsulPhoxide二甲基亚砜PBSPosPhatebufferedsolution磷酸盐缓冲液1温州医科大学硕士学位论文低氧诱导肾上腺髓质素对卵巢癌细胞及在体肿瘤的生长促进作用研究中文摘要目的:研究肾上腺髓质素对体外培养的卵巢癌细胞以及在体肿瘤中生长的作用,为临床肿瘤治疗新靶点的研究提供有效的参考依据。方法:首先准备了三组卵巢癌细胞系,分别为A2780、SKOV3、HO-8910在10%胎牛血清的条件下培养,在培养至对数生长期后
6、进行低氧诱导,分析在低氧条件下ADM、VEGF以及HIF-1α的mRNA表达水平进行检测,比较低氧条件对三类基因转录水平的影响。使用ADM处理后,用流式细胞仪来检测细胞凋亡的情况。然后使用ADM-shRNA质粒及NC-shRNA转染各组细胞,对ADM基因的表达进行抑制后使用筛选出可稳定表达ADM-shRNA的细胞系,将该细胞系注射于裸鼠皮下,一周后建模成功。待皮下肿瘤成瘤后,选择成瘤大小相当的裸鼠随意编号并分组,分组后的裸鼠按照用药的不同分装进鼠笼中,编号并标记,分别为:①盐水+PBS组、②盐水+NC-shR
7、NA组、③盐水+shADM组、④顺铂+PBS组、⑤顺铂+NC-shRNA组、⑥顺铂+shADM组。各组裸鼠每天腹腔内注射5mg/kg的顺铂或皮下肿瘤内注射10g/kg的ADM-shRNA。对照组分别腹腔注射等体积盐水、皮下肿瘤内注射PBS或NC-shRNA作为对照。在连续观察肿瘤的生长,并观察28天以后,根据肿瘤体积来绘制生长曲线,然后取出肿瘤组织来进行相关指标的检测。结果:首先我们研究了低氧环境是否影响卵巢癌细胞ADM表达,以及其他促癌基因如VEGF、HIF-1的表达。RT-PCR结果发现,在A2780卵
8、巢癌细胞中ADM的mRNA表达随低氧时间的增加而出现显著增高(F(3,8)=9.054,P=0.0067)。其中,24h低氧组ADM的mRNA表达量比对照组升高3.72倍(P<0.0001)。而VEGF、HIF-1α的mRNA表达量同样随低氧时间延长而出现不同程度的升高(VEGF:F(3,8)=5.370,P=0.0364;HIF-1α:F(3,8)=7.288,P=0.0297)。2温州医科大学硕
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