肾上腺髓质素对离体小胶质细胞的作用

肾上腺髓质素对离体小胶质细胞的作用

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1、."'?.■.?...,,.'t-.V'?',点Vi/lsHV:/?Sc;i矿V>'一了学巧编号\10394品.^图书分类号042、.'.'.-心‘’一’--,学号20120947yy密级!一X冷'.癸'赠V評‘識茲绍:夺-’心巧护/喔巧是巧托大#,全日制学术学位研究生硕±学位论文肾上腺髓质素对离体小胶质细胞的作用\EffectofadrenonmedullinAMonmicrolia%()g??'>?invitro、i

2、\、’李军涛、,斗、??,一-叫、\.f'、学科专4k:细胞坐物举六二^,/V.NV\、'、八、‘:研究方向:神经细胞生勸学V运巧/I沪I..、';、指导教师:洪炎国教授;,<冷古,讀家\心、言.S申请学位级别:硕±学化Vy夺:巧..一‘'',.a/,V、;為,'"-’'---'V.?,:市?.V::-、:曰期:20巧%::如论文提交,年巧_邑过如巾;兴,’^.三疗论义评巧人*,巧為分%论文答辩日期:2015年5月27日!:,.

3、/心';答辩委员会主席一巧::J鑛fIi;綠矿,h.:令!;^声1:学位授予单位:福建师范大学:2015年月日、学位授予曰期',:Y、.媒,.,.為常啤,:是庐節年5月片瓦.N'.../..-.‘耐.、v;\;vvn〇y.兵巧v;I’’、‘'^'.-:..;义-’-':^v一.a;、r!/v乂户巧''■:V\i::中文摘要中文摘要:晋上腺髓质素enomedullinAM实验背景和意义(Adr,)最早是从人的嗜铭细胞瘤中分离到的多狀类激素,具有多种生物学功能,后来的

4、研究证实AM是降钩素基一-因相关化(calcitoninenerelatedetideCGRP),g,家族的个成员和著名的疼痛pp相关狀CGR一P氨基酸序列和云维结构上有着相似性。近阶段研究证实AM是种疼痛相关化,参与疼痛调节过程,但机制尚不明确。本实验研究实验室过去的在体模型的研究工作为基础,得出AM能活化小胶一一一质细胞送推论,为证实这推论,我们建立了种离体培养高纯度小胶质细胞的细胞培养方法,然后研究AM对小胶质细胞的作用。-?实验方法:建立小胶质细胞的离体原代培养技术,并此为基础,进步研充不同浓度

5、的AM对小胶质细胞的作用,通过实时定量PCR技术和免疫细胞化学染色的方法,检测小胶质细胞的AM受体和CGRP受体的表达变化和小胶质细胞形态的变化。研充结果:建立小胶质细胞离体原代培养技术,对比了经典的小胶质细胞培养法和营养饥饿处理的培养法,对比经典恒温振荡法2、利多卡因分离法种分离方法优劣,选取能够获得高纯度,,高质量数量多的小胶质细胞的改进于经典恒温振荡法的饥饿培养震荡法作为本实验纯化小胶质细胞的实验技术。检测不同浓度AM-(1100nM)和AM不同作用时间(Id、3d)时,10nM和100nMAM浓度下

6、作用3d后,小胶质细胞胞体变大,突起回缩。小胶歲细胞的AM受体和CGRP受体的表达上调。一研巧结论:实验结果表明:①在培养过程中加入饥饿处理这过程有助于获得更多的,状态好的小肢质细胞。②AM能够使小胶质细胞表面的AM受体和CGRP受体的mRNA表达增加。⑤AM能引起小胶质细胞细胞形态和细胞功能的改变。--,42,PCR关键词:肾上腺髓质素,小胶质细胞OX肾上腺髓质素受体,qRTIAbstractAbstractAMwasinitalsolatefromheochromoctomvarilyi

7、dhumanpyandhasaietofyblit.aveconfirmed化attsiiiologicaactivySomestudieshiiamemberof化ecalctonn呂e打erelatedpeptide(CGRP)family.AMisverysimilarto1:hepainrelahdpeptideCGRP-instructureandfunctionItsweUtta打daha.iknownhaCG民Pmicroglive

8、averyttriro.erstudiesshowniimporanolenneupadiicpainFurth化atAMisi打vo

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