单重pcr诊断手部非结核分枝杆菌感染初探

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1、分类号：R604学号：2010462重最嚣警尾学校代码：10661密级：公开硕士学位论文(专业型学位)单重PcR诊断手部非结核分枝杆菌感染初探ApreliminarystudyofmonoplexPCRindiagnosisofhandinfectionsbynon-tuberculousmycobacterium2013年5月遵义医学院硕士研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发

2、和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：噌碜阳签字日期：卯l；年J月矽日遵义医学院学位论文版权使用授权书本人完全了解遵义医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：遵义医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘，5允许论文被查阅和借阅。本人授权遵义医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文，即：遵义医学院具有学位论文的数字化制品复制权，信息网络传播权和汇编权。保密的学位论文在解密后适用本授权书。学位论文作者签名：

3、唁签倒签字日期：矽『；年J一月矽日Il导师签名：签字日期：矽，多年厂月77遵义医学院硕}学位论文英文缩略词表缩略词英文全称bpDNAHsp65ISITS2basepair中文全称碱基对deoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸heatshockprotein65insertionsequence热休克蛋白65插入序列16S一23SribosomalRNAintergenicspace16s～23srRNA基因间隔区序列NTMnon-tuberculousmycobactefium’非结核分枝杆菌PCRP6123plasmid6123RNARD

4、BHRFLPSCCPTEribonucleicacid聚合酶链反应质粒6123核糖核酸reversedotblothybridization反向斑点杂交restrictionfragmentlengthpolymorphism限制性片段长度多态性分析singlestrandconformmionpolymorphism单链构象多态性TriS．EDTAIⅡ三羟甲基氨基甲烷一乙二胺四乙酸目录目录1．单重PCR诊断手部非结核分枝杆菌感染初探⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ⅡI中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2前言⋯···⋯⋯························⋯·········000···0000000000000⋯⋯···⋯4刖舌”””⋯⋯“””””””“””一”⋯”一”“。“’””一”““4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6结果···············⋯···⋯························-································12讨论·····················

6、····························⋯·-···························21结论····················································⋯··⋯·····················29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302．综述：非结核分枝杆菌检测技术研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯323．致{射····················································⋯⋯···············

7、········424．作者简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43Ⅳ遵义医学院硕{：学位论文中文摘要单重PCR诊断手部非结核分枝杆菌感染初探中文摘要目的：通过特异性的单重PCR检测手部非结核分枝杆菌，寻找快速、准确的诊断方法。方法：取临床病例手部NTM感染的病灶组织20例，一份行病理检测，一份提取病灶组织中非结核分枝杆菌DNA。选取感染手部常见的非结核分枝杆菌常见菌种，通过Genbank数据库和文献找到非结核分枝杆菌亚种的特异性基因片段5种，分别是hsp65、ITS2、ISl245、IS2404、P6123，根据靶序列设计引物。提取

8、临床标本及标准菌株的总DNA进行靶序列的PCR，扩增条件如下：退火温度55℃、退火温度梯度52