天麻酚性成分对h2o2诱导pc12细胞氧化损伤的保护作用研究

天麻酚性成分对h2o2诱导pc12细胞氧化损伤的保护作用研究

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1、秀旬中运室内硕士学位论文天麻酚性成分对H202诱导PCI2细胞氧化损伤的保护作用研究申请人姓名塞金隆学科、专业虫药堂申请学位类型堂苤型堂僮指导教师挂壹教援云南中医学院学位论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标注并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名:日期:—埠年立月—蔫L日云南中医

2、学院学位论文使用授权声明云南中医学院有权保留使用本人学位论文,同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权云南中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存或汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)学位论文作者签名:学位论文导师签名:日期:皿年—芷月二厶日、日期:逊年—i月j址日本人及导师同意将论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子社”进行电子和网络出版,并编入CNKI系列数据库,传播本学位论

3、文的全部或部分内容,同意按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。学位论文作者签名:学位论文导师签名:日期:渔瑟年上月—盟日日期:坶年—娶月二&日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lAbstract..........................................................................................zl英文索引表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8弓I言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.9实验研究第—部分实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第二部分PCI2细胞体外生长特性的探讨⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.162.1PCI2细胞的复苏、传代培养与冻存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162.2培养细胞的计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.162.3MTT法绘制PCI2细胞生长曲线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172.4细胞计数法绘制PCI2细胞生长曲线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182.5台盼蓝染色计数法绘制PCI2细胞生长曲线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1

5、92.6d、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2l第三部分天麻酚性成分抗氧化损伤作用研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233.1过氧化氢致PCI2细胞氧化损伤模型的复制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯233.2依达拉奉对PCI2细胞氧化损伤模型的保护作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283.3天麻提取物及酚性成分对PCI2细胞氧化损伤模型保护作用的活性筛选323.4天麻提取物及酚性成分对PCI2细胞氧化损伤模型的保护作用研究⋯⋯56讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..73结{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.76参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.77综j苤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯78攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯85致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93中文摘要天麻酚性成分对H:O:诱导PCI2细胞氧化损伤的保护作用研究研究生:文金隆指导教师:林青教授目的:课题组前期研究证明天麻具有较强的抗脑缺血再灌注损伤作用,并提示其作用机制与抗氧化损伤有关,其活性为一组脂溶性酚性成分。本研

7、究以H202诱导损伤PCI2细胞为细胞氧化应激损伤模型,对天麻3个提取物和15份单体成分进行活性筛选,探讨天麻酚性成分对细胞氧化应激损伤的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法:l、采用RPMI.1640培养基、含10%FBS和0.4%双抗的常规培养条件对PCI2细胞进行培养、传代和冻存,并以M1vr法、细胞计数法和台盼蓝染色计数法绘制其生长曲线,初步掌握PCI2细胞的体外生长增殖特性。2、采用细胞形态学观察和MTT法测定细胞存活率作为评价指标,探讨研究用H202诱导PCI2细胞氧化损伤模型的适宜浓度。3、采用细胞形态学观察和MTT法测定

8、细胞存活率作为评价指标,探讨研究用依达拉奉对H202诱导的PCI2细胞氧化损伤模型的有效浓度。4、采用细胞形态学观察和MTT法测定细胞存活率作为评价指标,评价天麻3

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