正常人肝组织及肝癌相关wga亲和型糖蛋白质组学的研究

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5、ointPeptidemassfingerprintingpeptide：N-glycosidaseFSodiumdodecylsulfateN，N，N，N-Tetra-methylethylenediamineTimeofflightWheatgermaggtutininN-糖基化位点预测光学密度磷酸盐缓冲液苯甲基磺酰氟聚偏二氟乙烯聚丙烯酰胺凝胶电泳过碘酸氧化等电点肽质量指纹谱N-糖苷酶F十二烷基硫酸钠四甲基乙二胺飞行时间麦胚凝集素·72·论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特

6、别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者张磷蹴丑二!：!论文使用授权声明本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采_睡；影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：导硕士论文正常人肝组织及肝癌相关WGA亲和型糖蛋白质组学研究中文摘要蛋白质糖基化作为一种重要的翻译后修饰对蛋白质结构和

7、功能如对蛋白质的折叠、运输、定位和功能表达起着重要的作用。许多疾病的发生与蛋白质糖链结构异常有关。目前糖蛋白质组学研究热点主要集中于表达蛋白质组学和比较／差异糖蛋白质组学。至今没有一个完整数据库全面阐述正常生理状态下所有糖基化的蛋白质，也未见有系统的糖蛋白质组学手段筛查病理过程相关的异常糖基化蛋白质。肝癌的血清糖蛋白中有许多糖链结构发生变化，如：唾液酸增多、N．乙酰氨基乳糖重复顺序出现、平分型GieNAc增加等。本研究利用麦胚凝集素(WGA)能够特异性识别带有唾液酸的聚糖或带有平分型GIeNAe、N．乙酰氨基乳糖重复序列的复

8、杂型或杂合型聚糖及相对高通量的糖蛋白质组学共性技术平台，即凝集素亲和层析、双向电泳(2-DE)胶上荧光显示联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI—TOF—MS／MS)分析，初步建立了正常人肝脏组织WGA亲和型糖蛋白表达谱和数据库。同时联合应用凝集素亲和层析、2．DE、复合蛋白质组