早期集束化治疗对脓毒症大鼠肠道微生态的影响研究.pdf

《早期集束化治疗对脓毒症大鼠肠道微生态的影响研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R378密级：公开学号:2015202015单位代码：10759石河子大学硕士学位论文早期集束化治疗对脓毒症大鼠肠道微生态的影响研究学位申请人杨俊停指导教师张万江教授申请学位门类级别医学硕士学科、专业名称病理学与病理生理学研究方向感染性疾病的病理生理学所在学院医学院中国·新疆·石河子2018年05月Effectsofearlybundletherapyonintestinalmicro-ecologyofSDratsofsepsisADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmento

2、ftheRequirementsFortheDegreeofMasterofMedicineByJuntingYang(Pathologyandpathophysiology)DissertationSupervisors:Prof.WanjiangZhangMay，2018石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研

3、究生签名：时间：年月日使用授权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日摘要目的：探讨研究早期集束化治疗对脓毒症大鼠肠道微生态的影响，以及与脓毒症大鼠机体和肠道免疫功能的变化之间的相关性，揭示早期集束化治疗脓毒症的疗效机理，为阐明脓毒症的发生发展的机理提供理论依据，

4、为探索脓毒症的诊断和治疗方案的优化奠定基础。材料与方法：随机将80只（200-250g）SD雄性大鼠分成5组：假手术组（sham），脓毒症组（CLP），早期集束化治疗组(imipenem+NS组)，环磷酰胺组（CTX），早期集束化治疗联合环磷酰胺组(imipenem+NS+CTX组)。采用盲肠结扎穿孔术（CecalLigationandPuncture,CLP）复制SD大鼠脓毒症模型。假手术组给予同样的手术操作，但不进行穿孔及结扎。判断和鉴定脓毒症模型复制成功后，通过腹腔注射生理盐水（35ml/kg）、亚胺培南（120mg/Kg）及环磷酰胺（10mg/kg）干预

5、治疗。记录各组大鼠存活时间和数量，并绘制生存曲线，定量分析各组大鼠生存率。通过荧光示踪法检测各组大鼠门静脉血中FD-70浓度，定量分析各组大鼠肠道通透性。通过HE染色各组大鼠空肠组织切片，观察各组大鼠肠壁组织损伤；并利用TUNEL法，定性及定量分析肠道黏膜细胞凋亡水平，通过蛋白印迹技术（Western-blot技术），检测各组大鼠结肠组织紧密连接蛋白（occludin）表达水平，探讨分析细胞间通透性改变。通过ELISA法，检测血浆中炎症因子（IL-6，IL-10，TNF-α）的表达水平，分析炎症因子对肠道通透性的影响。结果:1.成功复制脓毒症模型;2.观察各组大

6、鼠7天生存率，其中CLP组、imipenem+NS组、imipenem+NS+CTX组的生存率分别为0%、50%、70%。其中imipenem+NS+CTX组可明显提高SD大鼠生存率。差异具有统计学意义（p<0.05）；3.通过病理切片HE染色观察肠壁组织病理损伤情况、TUNEL法检测肠粘膜上皮细胞凋亡水平。结果显示：CLP组大鼠肠粘膜损伤及上皮细胞凋亡最为明显，其它治疗组肠粘膜损伤及肠上皮细胞凋亡均有不同程度改善；与CLP组相比，imipenem+NS组和imipenem+NS+CTX组的肠粘膜损伤程度及肠上皮细胞凋亡水平明显降低，差异具有统计学意义（p<0.

7、05）;4.Western-blot技术检测肠组织occlucin蛋白表达水平、荧光显色法检测血浆中FD-70水平，评估肠壁通透性变化情况。结果显示：CLP组occludin蛋白表达量明显下调,血浆中FD-70水平明显升高，肠壁通透性明显增加，imipenem+NS组和imipenem+NS+CTX组中occludin蛋白表达量均有不同程度的上调，血浆中FD-70水平较明显降低，肠壁通透性明显降低。差异具有统计学意义（p<0.05）；5.炎症因子可以反映机体的免疫功能，同时也可影响肠壁组织通透性。结果显示：CLP组TNF-α、IL-6血浆水平明显升高；imipe

8、nem+NS组和imip