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时间:2019-03-07
《tgf-β1对滋养细胞htr-8svneo细胞系增殖侵袭的影响及机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。研究生签名玮栅导师签名:睁该学院领导签名:’伽一年f月二7日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中
2、不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。基研究生张吲丝烧翩虢采牦仞传年f月'7日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文TGF.61对滋养细胞HTR.8/SVne0细胞系增殖侵袭的影响及机制研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22结j念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26综述TGF一[31/smad通路对滋养细胞增殖和浸润的影响的相关研究⋯3l致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
4、⋯⋯39中文摘要TGF.p1对滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系增殖侵袭的影响及机制研究摘要目的:滋养细胞是人体极为奇特的细胞,来源于胚胎的胚外层细胞,具有侵蚀性,在胚胎植入过程中,滋养层细胞发挥着类似肿瘤的特性而侵入子宫基质,相应的子宫反应内膜蜕膜化,包括细胞分化及细胞外基质重建,并创造了一个环境,在最初阶段允许滋养层细胞的侵入,继而又控制其过度侵入以形成胎盘。这一侵蚀过程,在时间及空间上受到母体及自身的多种旁分泌和自分泌因子的严格网络级联调控,其中任一环节发生异常,都有可能会导致自然流产、先兆子痫、妊高症、绒毛膜癌等妊娠相关疾病
5、。转化生长因子一p(transforminggrowthfactor.p,TGF.p)超家族是有许多细胞因子所组成的大家族,其信号沿TGF.p族配体一受体一SMAD蛋白一转录因子一DNA表达等步骤来控制调节细胞的增殖、分化、移行和凋亡。TGF.Bl是最早证实参与滋养细胞侵入调节的细胞因子。研究发现,受孕子宫内膜表面上皮细胞、基质细胞、蜕膜细胞中TGF-p1及TpR较未孕时显著增加;胎盘绒毛小叶的合体滋养细胞、细胞滋养细胞及绒毛的间质滋养细胞均有TGF.131的表达,TGF.pl调节滋养层的分化,即有助于滋养层的黏附,又避免滋养细胞过度
6、增殖、浸润,但具体机制尚未阐明。本实验以滋养细胞HTR-8/SVneo细胞为模型,采用不同剂量外源性TGF.B1作用于HTR-8/SVneo细胞系,观察HTR-8/SVneo细胞的增殖、侵袭改变,TGF.[31/Smads信号传导通路中关键组分Smad3、Smad7mRNA的表达情况,进一步揭示该信号通路在滋养细胞调控机制中的作用,从而为滋养细胞疾病的治疗提供新的思路。方法:l本文的研究对象为永生化的滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系。2取指数生长期的HTR-g/SVneo细胞按初始浓度为3x104/mL接种于96孔板,37℃、5%
7、C02培养箱中培养,融合度达到60%后换成无血清培养基,使其继续饥饿同步化24h;然后分别给予2.5r,g/L,5.Ortg几,10.Opg/L,12.5pg,L,15lag/L,25.0¨g/L,50.0肛egL,100.0pg/L,200.OIJtgm中文摘要的TGF.Bl对HTR.8/SVneo细胞进行外源性干预,分别于24h、48h、72h终止培养并收获细胞;同时设立零对照组及空白对照组,每组设6个平行孔,采用MTT比色法检测各组细胞的增殖活力;3以3×104/mL细胞浓度将HTR-8/SVneo细胞接种到6孔板,融合度达到6
8、0%后换成无血清培养基,使其继续饥饿同步化24h,加入不同浓度的人重组TGF.p1,即终浓度分别为0“g/L(对照组),1.0肛g/L,10.0昝g/L,100.%g/L,共温育48h后终止培养,采用逆转录.聚合酶链反应
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