环境激素双酚a对sd大鼠睾丸生精细胞凋亡作用的实验研究

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2、立撰写，文责自负。研究生签名：劾锄厂芝导师签章：即乃年乡月巧日t～．一一镰毒．亭。＼．＼镧譬／瓠拶：霸o℃尹佃～∥∥趟目录lIIIIllIIIPillflUIIIIIIIIIIIfY2337464中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文环境激素双酚A对SD大鼠睾丸生精细胞凋亡作用的实验研究—1L—j—．日{J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24综述生精细胞的凋亡和男性不育⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48中文摘要环境激素双酚A对SD大鼠睾丸生精细胞凋亡作用的实验研究摘要目的：当前，随着工业化生产的进一步大发展，工业污染物大量

4、排放，恶性肿瘤、代谢性疾病、男性不育等发病率逐年上涨。已有大量的实验研究发现，这些疾病发生率的上升与环境污染物的排放有着密不可分的关系。因此，环境污染亦成为一个全球性的亟待解决的问题。在此大背景下，环境内分泌干扰物(即环境激素)也成为国内外学者的热门研究对象。双酚A(bisphenolA，BPA)即是环境内分泌干扰物的一种，广泛应用于人们的生产生活；由于其具有弱雌激素和强抗雄激素作用，具有很强的生殖发育毒性，越来越得到国内外学者的重视。而且，近几年男性的生育能力明显下降，科学家将焦点更多的放在了对环境内分泌干扰物尤其是双酚A的研究上。本实验就是通过制造双酚A染毒动物模型，研究双酚A在体内

5、浓度积聚对大鼠睾丸的毒性作用，研究生精细胞凋亡途径中几种关键蛋白Bcl．2、CytC、Caspase．3的表达情况，并观察双酚A染毒大鼠精子的变形情况，以进一步证实双酚A的生殖毒性作用，为双酚A影响男性生精细胞凋亡提供更加直接的实验证据，从而有望为临床上预防和治疗男性不育寻求更多的可靠依据。方法：1实验动物：本实验所用动物均为由河北医科大学实验动物中心采购的清洁级SD雄性大鼠，40只，8周龄，体重在175．2109。所有大鼠均分笼适应性喂养1周，自由进食饮水。2实验动物分组及造模：将40只SD大鼠随机分为4组(对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组)，采用灌胃针将溶于玉米油的双酚A按照不同

6、浓度(O、2、20、200mg／Kg)灌服，每日1次，每次lml，共持续8周，每周称重1次，并按照各组SD大鼠的体重均数及时调整双酚A的给药剂量。3实验标本处理：染毒结束后，将SD大鼠依次称重、处死，迅速取出睾丸、附睾依次称重，并计算脏器系数；将睾丸用多聚甲醛固定，制成中文摘要石蜡切片行免疫组化染色分析；取附睾，制成精子混悬液于镜下计数精子数、观察精子活动、统计精子畸形率；结果采用SPSS13．0软件进行统计分析。结果：1SD大鼠的日常活动观察：随着双酚A灌胃染毒时间延长，高剂量组SD大鼠逐渐出现烦躁不安、易兴奋、易激惹症状，尤其是在灌胃时反抗强烈，但是在半小时后症状消失，并且出现被毛凌

7、乱、不光滑，活动减少、进食减少、稀便等，低、中剂量组和对照组相比较，则无明显差别；2双酚A对SD大鼠体重以及睾丸重量的影响：中、高剂量组染毒SD大鼠与对照组SD大鼠相比，体重增长缓慢，差异具有统计学意义(P