三甲复脉汤对帕金森大鼠多巴胺神经元的影响研究

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1、广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名盔甚杰日期：忉叶够月叼日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允

2、许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名量2：!盎论文导师签名日期：加f忏箩月1日中文摘要帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)是第二大神经系统退行性疾病。PD的特征性病理变化为黑质、纹状体多巴胺(dopamine，DA)神经元和DA的进行性丢失，以及神经元内嗜酸性包涵体Lewy小体形成。随着帕金森病病情的进展，黑质．纹状体通路及

3、与之具有解剖联系的神经区域相继受累，从而导致患者出现静止性震颤、肌强直、运动迟缓等运动障碍症状，以及便秘、多汗、性功能障碍、失眠、抑郁、焦虑、认知障碍等一系列自主神经及精神症状。目前临床对帕金森病的治疗亦仅限于对症支持治疗，未能从根本上阻止病变的进展，因而神经病学界一直视帕金森病为难治的“三不”(病因不明、疗效不好、预后不良)性疾病。虽然病因不明，遗传易感性、年龄老化、环境毒素等原因均与帕金森病发病有关联。鱼藤酮是一种天然有机杀虫剂，可选择性抑制细胞内线粒体复合物I，造成线粒体功能障碍及能量供给

4、不足，并产生大量氧自由基，使对氧化应激具高度敏感性的黑质纹状体DA系统变性损伤。鱼藤酮模型可以很好地模拟人类PD慢性进展病程，符合PD行为学和神经化学改变，并能观察到路易小体的形成，是较为理想的帕金森病模型，对研究评价帕金森药物的神经保护作用有很好的作用。寻找治疗PD的新方法是当今PD临床与科研的重要课题。由于目前帕金森的发病机制尚未完全明确，其治疗亦缺乏特异性。目前帕金森病的治疗仍以药物为主，主要的目的是控制临床症状。现有的研究显示，中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死导致多巴胺含量减少，由此出现一

5、系列包括运动系统和非运动系统功能障碍的临床症状。目前临床上针对帕金森的药物，大都基于中枢神经系统多发胺含量来展开，或外源性地提高其含量，或减少多巴胺的丢失。使用药物对抗帕金森病，症状在短时间内可有效地控制，长期使用则不可忽视地出现明显的不良反应，最常见的有恶心、呕吐、腹痛等消化道症状。而中药因为其具有个性化的治疗方案，可以兼顾并发症，毒副作用小，与西药联合用药是还可以提高西药的疗效以及减轻西药的毒副作用，故而成为帕金森病的治疗中的一个研究热点。中医将帕金森病归为“颤病”，历代医家对病因病机有诸多

6、论述，但总以风动为主。三甲复脉汤具有滋阴复脉，潜阳熄风，养心安神，痰瘀并治，补肾健脑等功效，与颤病之病机相合。实验目的：研究三甲复脉汤对帕金森病大鼠多巴胺神经元的影响，并根据大鼠神经行为学检测以及大鼠多巴胺神经递质的改变情况观察三甲复脉汤对帕金森病的疗效。实验方法：实验一：雄性Wistar大鼠30只，使用随机区组设计，分3组，正常组、溶剂对照组、模型组。正常组不予处理。溶剂对照组采用颈部皮下注射法按lml／kg注射葵花油。模型组动物也采用颈部皮下注射法，按lml／kg注射鱼藤酮葵花油乳化液，鱼藤

7、酮在葵花油乳化液中浓度为2mg／ml。各组均观察4周时间，实验开始前予称重及悬挂实验检测。实验开始后每周行称重及悬挂实验等行为学检测，持续4周。实验结束后，取材检测。实验二：雄性Wistar大鼠50只，使用随机区组设计，分5组，每组10只，分别为正常组、溶剂对照组、模型组、美多芭组、三甲复脉汤组。空白组：不做任何处理，第5周开始以生理盐水2ml灌胃，每天1次，持续2周。溶剂对照组：采用颈部皮下注射法按lml／kg注射葵花油，每天注射1次，连续注射4周。第5周开始每天以生理盐水2ml灌胃，每天1次

8、，持续2周。模型组：采用颈部皮下注射法按lml／kg注射鱼藤酮葵花油鱼藤酮葵花油乳液，每天注射1次，连续注射4周。第5周开始每天以生理盐水2ml灌胃，每天1次，持续2周。美多芭治疗组：采用颈部皮下注射法按lml／kg注射鱼藤酮葵花油鱼藤酮葵花油乳液，每天注射1次，连续注射4周。第5周开始每天以美多芭混悬液2ml灌胃，浓度为22．59／kg，每天1次，持续2周。三甲腹脉汤组：采用颈部皮下注射法按lml／kg注射鱼藤酮葵花油鱼藤酮葵花油乳液，每天注射1次，连续注射4周。第5周开始每天以三甲复脉汤2m