维生素k3协同三氧化二砷(as203)诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞株pc-3凋亡的研究

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1、维生素K3协同三氧化二砷(As203)诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC一3凋亡的研究计：学位论文：36页表格：8个插图：24幅邸彦橙指导教师：姜涛教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：外科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用

2、过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：戤垂攫签字日期：目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)日U吾”一”””””一””一“”一“”一”“一”””””一””⋯一“”一”⋯5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l8(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22三、文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOD⋯⋯⋯⋯⋯⋯31四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36

4、维生素K3协同三氧化二砷(As。03)诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3凋亡的研究硕士生姓名：专旨导教师：指导小组：专业名称：邸彦橙姜涛教授外科学摘要目的：三氧化二砷(As203)可以诱导雄激素非依赖性前列腺癌(HRPCa)细胞株PC．3细胞凋亡，但是高剂量As203的毒副作用制约了其临床使用剂量，这严重影响了三氧化二砷的临床疗效，而寻找一种可以增加As203诱导凋亡效应的辅助药物来打破As203临床应用剂量的瓶颈是一种新的思路。本课题通过研究维生素K3联合As203作用于PC．3细胞株生物学效应，探索维生素K3是否与As203有协同作用，为As2

5、03治疗HRPCa及众多实体瘤的临床应用奠定理论基础。方法：相差显微镜观察不同浓度的维生素K3和As203，单独或联合作用于体外培养的雄激素非依赖前列腺癌细胞PC．3细胞株，MTT法检测细胞的存活率，流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡率，AnnexinV、PI双染色法，荧光显微镜观察细胞凋亡，RT—PCR检测两种药物单独及联合作用后，HRPCa细胞株PC．3细胞中Survivin基因的表达情况。结果：MTT法检测结果显示：两种药物单用时，对细胞生长具有抑制作用，各组问具有统计学差异(P

6、Ca细胞株PC．3的生长抑制率，组间具有统计学差异(P<0．01)；药物相互作用指数(CDI)均<1，说明两药具有协同作用。FCM检测结果显示：两种药物单用时，均可见细胞死亡，以凋亡为主；二者联合应用时，细胞的死亡率明显高于二者单独作用细胞组，并且其死亡率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而提高，死亡细胞以凋亡为主。免疫荧光显微镜分析细胞死亡形态，正常细胞组基本未见荧光，用药组可见荧光，低浓度以绿色荧光为主，高浓度以红色荧光为主。RT--PCR检测结果显示Survivin基因的表达强度随着药物浓度的增加逐渐变弱。结论：维生素K3可协同As203诱导前列腺

7、癌细胞株PC．3凋亡，故可降低As203了的使用剂量，从而减少其副作用，为As203治疗前列腺癌临床广泛应用奠定了基础。关键词：前列腺癌PC．3细胞三氧化二砷维生素k3细胞凋亡2TheresearchofVitaminK3co¨aborativearsenictrioxide(As203)inducedandrogen--independentprostate⋯■一·■CanCercellilnesDc-3aoootosisMasterdegreecandidate：DiYanchengSupervisor：ProfessorJiangTaoVice—s

8、upervisor：ProfessorJiangTaoMajor：Surgery