cathepsinb-caspase信号通路参与脑缺血诱导的星形胶质细胞死亡

《cathepsinb-caspase信号通路参与脑缺血诱导的星形胶质细胞死亡》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含兔获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：≤盏垒垒日苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院

2、文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名：盔盏堑Et期：导师签名：期：芦三CathepsinB-Caspase信号通路参与脑缺血诱导的星形胶质细胞死亡中文摘要中又捅要目的：研究CathepsinB．Caspase信号通路在脑缺血诱导的星形胶质细胞死亡中的作用及Cat

3、hepsinB特异性抑制剂CA．074Me对其的影响。方法：采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanentmiddlecerebralarteryocclusion，pMCAO)方法，建立脑缺血的大鼠模型。大鼠脑缺血前10min或缺血后6h侧脑室注射CA．074Me，以脑梗塞体积、行为学症状及MAP2蛋白表达等指标评价CathepsinB特异性抑制剂CA一074Me对脑缺血的神经保护作用。应用相对脑血流(relativecerebralbloodflow，rCBF)检测观察CA．074Me对pMCAO大鼠局部脑血流的影响。WesternBlot和免疫组织

4、化学方法检测皮层缺血区CathepsinB．CaSpaSe通路相关蛋白的时程变化以及CA．074Me对蛋白表达的影响。采用原代培养的新生大鼠皮层星形胶质细胞缺氧缺糖(oxygen—glucosedeprivation，OGD)方法，建立脑缺血的细胞模型。LDH法检测OGD诱导的星形胶质细胞乳酸脱氢酶漏出率。WesternBlot方法检测OGD诱导的原代培养星形胶质细胞中CathepsinB蛋白的时程变化以及CA．074Me对CathepsinB．Caspase通路相关蛋白表达的影响。结果：术前lOmin给予CA-074Me(0．65-5．2l上g／ld)均

5、可有效地减小pMCAO大鼠脑梗死体积妒<0．01)，其中0．651xg／Ixl和1．31xg／lxl两个剂量能有效的改善pMCAO大鼠的行为学症状俨<0．05，P<0．01)及大脑皮层缺血区MAP2蛋白的表达；术后6小时给予1．31．tg／1．tlCA一074Me，仍然能显著减小pMCAO大鼠脑梗死体积(尸<0．01)，有效改善pMCAO大鼠行为学症状妒

6、CathepsinB在6h明显激活妒<0．01)；Bid蛋白6h开始激活(尸

7、进一步证明了皮层缺血区星形胶质细胞CathepsinB和Caspase3分别在6h和12h激活，给予CA．074Me处理后两者表达均下调。LDH结果显示，CA．074Me(5，10，20¨M)能剂量依赖性地降低星形胶质细胞OGDl2h后LDH的漏出率(尸<0．05，P<0．01)。WesternBlot结果显示，原代培养的星形胶质细胞OGD6h后CathepsinB蛋白明显激活(P

8、0．01)，说明CA．074Me能有效的抑制OGD诱导的星形胶质细