fshlhgnrh及其受体基因对巴美肉羊繁殖力的影响

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1、分类号S852.7学校代码10129UDC577学号2009201051FSH/LH/GnRH及其受体基因对巴美肉羊繁殖力的影响heinfluenceonBayannurMuttonSheepsheep'sfecundityofFSH/LH/GnRHandreceptorgene申请人：韩有胜学科门类：农学学科专业：基础兽医学研究方向：动物组织胚胎与发育生物学指导教师：曹贵方教授荣威恒研究员论文提交日期：二〇一二年六月摘要巴美肉羊是蒙古羊与德国肉用美利奴公羊，采取级进杂交育种方法培育而出的肉用性能突出的肉羊品种。为了揭示

2、巴美肉羊繁殖性能，使巴美肉羊这一宝贵资源能得到有效利用，本研究以巴美肉羊为实验材料，首先通过SSCP技术对候选基因（GnRHR、FSHβ、FSHR、LHβ、LHR）进行多态性检测，并采用实时荧光定量PCR（RQ-PCR）的相对定量方法对GnRHR、LHR和FSHR基因在单羔和双羔的巴美肉羊发情1h、发情12h发情24h的卵巢、子宫组织中差异表达进行研究，同时对左右卵巢的中FSHR、LHR和FSHβ基因的表达差异进行研究。（1）采用SSCP技术对上述5个基因进行多态性性分析，发现FSHβ基因外显子2存在多态性，存在AA、B

3、B、CC、AB、AC和BC6种基因型，BB型与AA型相比在147bp处有C→T突变，为沉默突变；CC型与AA型相比在第87bp有C→T突变，第147bp处有C→T突变，两处均为沉默突变。巴美肉羊AA、AB、AC和CC基因型频率分别为0.4733、0.2667、0.1533和0.0867。AB基因型巴美肉羊产羔数最小二乘均值比AA基因型的多0.2257只(P<0.05)，比AC基因型的多0.6446只(P<0.05)，比CC基因型的多0.3135(P<0.05)。FSHβ基因的A等位基因可能具有增加产羔数的作用。其他4个基

4、因没有检测到多态性。（2）采用相对定量的方法建立了巴美肉羊GnRHR、LHR和FSHR基因的RQ-PCR反应体系，子宫组织以单胎发情1h巴美肉羊定量为对照，结果显示：GnRHR和FSHR基因的mRNA表达量，双胎组表达量大于单胎组表达量，1h到24h表达量呈上升趋势，LHRmRNA表达量双胎组低于单胎组；在卵巢组织中以单胎巴美肉羊左则卵巢为对照，实验表明：12h组表达量高于1h和24h组，同一时期三个基因的表达量双羔大于单羔，同时3个基因在左侧卵巢的表达量高于右侧卵巢。关键词：子宫；卵巢；GnRHR；FSHβ；FSHR；

5、LHβ；LHR；SSCPTheinfluenceonBayannurMuttonSheepsheep'sfecundityofFSHLHGnRHandreceptorgeneAbstractBayannurMuttonSheepisahighmeatperformanceofSheepvarieties.ItiscreatedbyMongolianSheepandMerinoSheepthroughgradingbreedingmethods.Inordertorevealitsreproductiveperforman

6、ceandmakeaneffectiveutilizationofthispreciousresource-BayannurMuttonSheep,thisresearchusedBayannurMuttonsheepastheexperimentmaterial.First,thepolymorphismofcandidategenes(GnRHR、FSHβ、FSHR、LHβ、LHR)weredetectedthroughSSCPtechnology.Then,differentiallyexpressedresear

7、chofGnRHR、LHRandFSHRgeneswasdoneinovaryanduterustissuesofsingleBayannurMuttonSheep&biparousBayannurMuttonSheepindifferentestrousperiod(1h/12h/24h).Besides,DifferentialexpressionstudyofFSHR、LHRandFSHβgeneswasalsodonethroughReal-timeQuantitativePCR(RT-PCR)intheleft

8、andrightovarian.(1)ThepolymorphismofthesefivegeneswasdetectedthroughSSCPtechnology.Theresultsshowedthatpolymorphismwasonlyfoundintheexon2ofFSHβinthethreeamplif