杜仲不同产地遗传差异及化学组分分析

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1、中国抹耋斜学坼宪院学位论文学位论文作者指导教师姓名申请学位级别专业名称研究方向论文答辩日期黄伟卢孟柱研究员博士林木遗传育种种质资源评价2014年6月DissertationfortheDegreeAnalysisofGeneticDiversityandChemicalComponents．—ofEu,—"ulmoidePlanwithDjIfferentLociEucommiaulmoidesPlantswithOCationlCandidate：Supervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：Date

2、ofDefenee：Degree-Conferring-Institution：HuangWeiProf．LuMeng-zhuPh．DGermplasmEvaluationJune2014ChineseAcademyofForestry独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表

3、示谢意。学位论文作者签名：童牟日期：列侔1月午日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：2矿／俾7月牛日童律’、。f导师签名：勿·r年1月r日学位论文作者毕业联系方式工作单位：联系电话：13810029143电子邮件：h

4、uangwei_9lO@aliyun。COITI通讯地址、邮编：北京市朝阳区北苑家园望春园17#1#201100012摘要杜仲(EucommiaulmoidesOliv)，为杜仲科Eucommiaceae杜仲属EucommiaOliver●落叶乔木，是第四纪冰川侵袭后残留下来的孑遗古老树种，其近缘种类都己绝灭，有“活化石植物”的美称，现主要以栽培为主，被列为国家二类重点保护树种，我国是现存杜仲资源的惟一保存地。本研究以杜仲不同组织器官(根、叶、树皮)为实验材料，根据2010年版《中国药典》规定的松脂醇二葡萄糖苷、绿原酸的含量测定方法对不同产地杜仲进行

5、了评测，并对不同产地杜仲不同组织器官化学组分进行了全面分析，同时采用ISSR(inter-simplesequencerepeat)分子标记技术对不同产地杜仲的遗传差异进行分析评价。得到如下主要结论：(1)HPLC分析结果表明，湖北宜昌、贵州遵义的杜仲皮样品中松脂醇二葡萄糖苷的含量不符合药典标准；河南、陕西产杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷的含量最高，是药典标准的两倍还多；湖北、贵州、重庆等地的杜仲皮样品的均一性较好，而四川旺苍产杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷的含量要远低于省内其余地方的含量。此外，河南、陕西产杜仲叶中所含绿原酸含量最高，而整个四川产杜仲叶中绿原酸

6、含量接近，湖北、贵州产杜仲叶中的绿原酸含量为最低，因此，区分不同产地来源对于杜仲的质量控制具有重要意义。(2)用8对ISSR引物对15个不同产地的杜仲进行遗传标记，共扩增出102个DNA片段，多态性比率为88．2％：其有效等位基因数平均为1．781，基因多样度平均为0．443，Shannon信息指数平均为0．758，表明杜仲的不同产地的存在着较大的遗传差异，利用这些差异的分子标记可以鉴别不同产地来源。15个不同产地杜仲植物的遗传基因的相似度有65％，可大致分为三大类；从15个产地杜仲的遗传距离来看。杜仲产地间的遗传差异与其所在的地理位置远近分布相关性

7、明显。(3)从杜仲叶中提取了酸性多糖，通过对该酸性多糖进行部分酸水解、甲基化分析等研究证明EOP．1为杜仲叶中首次发现的一种多分支的酸性杂多糖，分子量约为6．0x105D，它由半乳糖醛酸、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿拉伯糖及葡萄糖组成，其中半乳糖含量较高。EOP．1主链结构可能为1，4连接的半乳糖醛酸聚糖，分支由多分支的1，3连接及l，6连接的半乳糖及1，5连接的阿拉伯糖组成。(4)对我国由北到南的五个不同产区的杜仲不同组织器官(叶、根、皮)细胞壁木质素、纤维素、果胶和半纤维素四个组分进行含量分析，并进一步测定了果胶和半纤维素中的中性单糖。研究结果表明

8、，总中性糖在叶组织中含量最高，在根、皮中呈现逐渐递减的趋势；糖醛酸组分在叶组织中含量也是最高，树皮中含量次之