小鼠精子常温运输与低温储存的研究

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1、万方数据学校代码：10225学号：S14633学位论文小鼠精子常温运输与低温储存的研究指导教师姓名：申请学位级别：论文提交日期：授予学位单位：王美珊李和平教授陈学进研究员硕士2014年4月东北林业大学上海交通大学医学院学科专业：动物遗传育种与繁殖论文答辩日期：2014年6月8日授予学位日期：答辩委员会主席：论文评阅人：东Jr-g4t犬学万方数据UniversityCode：10225RegisterCode：S14633㈣Y2723㈣499DissertationfortheDegreeofMasterStudyonMouseSpermatoz

2、oaTransportedatAmbientTemperatureandPreservedatCandidate：Supervisor：RefrigeratedTemperaturesWangMeishanProf．LiHepingProf．ChenXuejinAcademicDegreeAppliedfor：MasterSpeciality：Dateof0ralExamination：University：AnimalgeneticsbreedingandreproductionJune，2014NortheastForestry万方数据摘要

3、目的：探索常温下小鼠附睾尾运输的最佳条件，并消除运输液对精子可能存在的影响；研究4。C条件下储存附睾尾精了的可行性，利用辅助生殖技术建立意外死亡雄鼠和濒危品系的保种体系。方法：采用常温或4～8℃运输的方式，B6D2F1小鼠附睾尾在20ul或0lal运输液中进行运输，24h内检测附睾尾精子的活力、受精能力及其胚胎发育能力：B6D2F1、ICR、C57BL／6三种小鼠的附睾尾在4℃冰箱进行储存，利用IVF和ICSI技术探索不同储存时间对小鼠精子活力、受精能力和胚胎发育能力的影响。结果：常温运输不加运输液的条件下，运输的附睾尾的精子活动率和活力，均优

4、于20ul运输液中运输的附睾尾，但稍低于4～8℃加20ul运输液运输的附睾尾；B6D2F1、ICR、C57BL／6三个品系小鼠附睾尾在4。C冰箱储存后，其精子活力和受精能力随低温储存时问的增加而显著降低，储存0．4d内以B6D2F1为最高，ICR次之，C57BL／6最低。对4℃储存60d的B6D2F1附睾尾精．了进行胞浆内单精予注射，获得了45．5％的ICSI受精率。结论：无液体运输的方式适合于附睾尾的常温运输，同时这种方法还可以消除运输液对附睾精子存在的不良影响，而且常温附睾尾精子的运输对于小鼠种质库或者研究室之问，小鼠品系的交流具有极为重要

5、的应用价值；4℃无液体储存附睾尾可以获得较高的IVF和ICSI受精率，便于长期储存精予，且成本较低、应用范围广泛，对于意外死亡=的品系保存具有重要的应用价值。关键词附睾尾；运输；储存；体外受精(IVF)；胞质内单精子注射(ICSI)万方数据AbstractObjective：ToexploretheoptimalconditionsforcaudaepididymidestransportunderambienttemperatureandeliminatetheeffectoftransportmediumOilthetransportofc

6、audaepididymides．Toinvestigatethefeasibilityofcaudaepididymidesspermatozoamaintainedinarefrigeratorat4℃．Toestablishasystemforvaluablemalemouseunexpecteddieandendangeredstrainsconservationthroughassistedreproductivetechnology．Methods：Thetransportmethodsofcaudaepididymideswere

7、modifiedinthisstudyandthespermmotilities，fertilityanddevelopmentalabilitiesofIVFembryosaftertransportationatroomtemperaturesor和8℃in20u1oftransportmediumortransportmedium-freetubewerecompared．CaudaepididymidesofB6D2FI、ICRandC57BL／6micewerestoredinarefrigeratorat4"C．Theeffects

8、ofstoragetimeforspermmotilities，fertilityanddevelopmentalabilitiesofIVFandI