小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究

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1、小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究解剖学报1999年第2期第0卷论著作者：李子义　谭景和　孙兴参　刘忠华　周琪　贺桂馨单位：李子义谭景和　孙兴参　刘忠华　周琪　贺桂馨　东北农业大学生物工程系，哈尔滨　150030关键词：精子；球形精子细胞；显微注射；电活化；电融合；小鼠　　【摘要】　目的　研究动物受精机理。　方法　以昆明白鼠为实验动物，利用显微注射技术，对精子和球形精子细胞的显微注射受精进行了研究。结果　1.带下注射受精，注射4～6个精子的卵的受精率(32.5%)和卵裂率(25.0%)显著高于注射单个

2、精子的卵的受精率和卵裂率(分别为12.5%和6.3%)(P＜0.05)。2.带下注射4～6精子后，有第1极体卵母细胞的存活率(69.6%)、受精率(32.5%)和卵裂率(25.0%)分别高于无第1极体卵母细胞的存活率、受精率和卵裂率(分别为64.4%、20.7%和13.8%)，但两者无显著差异(P＞0.05)。3.胞质内精子注射卵的存活率(21.4%)极显著低于带下注射卵的存活率(69.6%)(P＜0.01)；而胞质内精子注射卵的受精率(35.5%)、卵裂率(32.3)%和囊胚率(20.0%)则高于带下注射卵的受

3、精率(33.3%)、卵裂率(25.0%)和囊胚率(10.0%)，但无显著差异(P＞0.05)。4.将球形精子细胞注入经电活化处理的卵母细胞的透明带下，注射卵的存活率为90.5%，电融合率为34.6%，2-细胞分裂率为28.3%。　结论　1.注射精子的数量对小鼠带下注射的受精率和卵裂率有显著影响。2.卵母细胞中第1极体存在与否对小鼠带下注射的受精率和卵裂率无显著影响。3.不同注射方法对小鼠卵的存活率有极显著的影响，而对受精率、卵裂率和囊胚率无显著影响。4.本实验所采用的电融合条件，尚未满足多数球形精子细胞与卵母细胞

4、融合之需要。FERTILIZATIONBYMICROINJECTIONOFSPERMATOZOONANDROUNDSPERMATIDINTOOOCYTEINTHEMOUSE　　LiZiyi，TanJinghe△，SunXingshen,LiuZhonghuan,ZhouQi,HeGuixin(DepartmentofBiotechnology,NortheastAgriculturalUniversity)　　【Abstract】ObjectiveTostudyfertilizationmech

5、anisminmammalsandprovideessentialdatafortreatinghumanmaleinfertility.Methods　Usingmicroinjectiontechnique,thefertilizationbymicroinjectionofspermatozoaandroundspermatidsintooocytesinthemousewassystematicallystudied.Results　1.Followingsubzonalinjectionofsperma

6、tozoaintooccytes,thefertilizationrate(32.5%)andcleavagerate(25.0%)intheoocytesinjectedwith4-6spermatozoaweresignificantlyhigher(P＜0.05)thanthose(12.5%and6.3%,respectively)intheoocytesinjectedwithasinglespermatozoon.2.Followingsubzonalinjectionof4-6spermatozoa

7、intotheoocytes,thesurvivalrate(69.6%),fertilizationrate(32.5%)andcleavagerate(25.0%)inthoseoocyteswithpolarbody1(PB1)werehigherthanthose(64.4%,20.7%and13.8%,respectively)intheoocyteswithoutPB1,butthedifferencewasnotsignificant(P＞0.05).3.Thesurvivalrate(21.4%)

8、intheoocytesinjectedwithasinglespermatozoonintothecytoplasmwassignificantlylower(P＜0.01)thanthat(69.0%)intheoocytesinjectedwith4

9、6spermatozoaintotheperivitellinespace(PVS).Thefertilizati