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时间:2019-02-25
《大鼠腹膜纤维化相关mirna初步筛选和验证》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、温州医学院硕士学位论文目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29以后的研究方向⋯⋯⋯⋯⋯
2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l附录一简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35发表的临床论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48温州医学院硕士学位论文全文缩略词表2温州医学院硕士学位论文3温州医学院硕士学位论文大鼠腹膜纤维化相关microRNA的初步筛选与验证目的:初步探索microRNA(miR
3、NA,miR)是否参与腹膜透析相关腹膜纤维化。方法:将sD雄性大鼠24只(体重150-J:109)随机平均分为3组:(i)正常对照组;(ii)生理盐水组:每日腹腔注射0.9%生理盐水20ml;(iii)高糖组:每目腹腔内注射4.25%含葡萄糖腹膜透析液20ml。4周后,进行2h腹膜平衡试验(PET),检测大鼠腹膜功能,处死大鼠,取大鼠腹膜组织,行光镜检查(HE、Masson染色),免疫组化(SP法)检测Q平滑肌肌动蛋白(Q—SMA)和胶原I(C01.I)的蛋白表达,RT-qPCR检测Q—SMA和C01.I的mRNA表达,基因芯片分析检测各
4、组miRNA。选取芯片分析显著差异表达的miRNA,进行RT-qPCR验证。结果:与空白对照组比较或与生理盐水组比较,高糖组大鼠的透出液葡萄糖浓度/初始腹透液葡萄糖浓度(D2/Do)和超滤量均明显减少,透出液尿素氮浓度厂血浆尿素氮浓度(D/P。。。)明显增3H(P值均0.05)。高糖组大鼠腹膜间皮下基质增厚、血管增生及炎症细胞浸润明显增加。与空白对照组比较或与生理盐水组比较,高糖组大鼠腹膜组织Q.SMA和C01.I的蛋白及mRNA的
5、表达量均显著升高(尸0.05)基因芯片分析提示:(1)与空白对照组比较或与生理盐水组比较,miR.31、miR一93、miR-100、miR。152和miR一497在高糖组大鼠腹膜组织中均呈显著性低表达,miR-122在高糖组大鼠腹膜组织中呈显著性高表达;(2)与空白对照组比较,miR-192、miR-194、miR.200b、miR.138和miR.146a等miRNAs也在高糖组大鼠腹膜组织中均呈显著性低表
6、达;(3)与生理盐水组比较,miR一199a.5p、miR-200e、miR-24.2、miR.27b、miR.30b一5p等miRNAs也在高糖组大鼠腹膜组织中均呈显著性低表达;(4)与空白对照组比较,miR.192、miR.194和miR.200b在生理盐水组大鼠腹膜组织中也呈显著性低表达。选取芯片分析显著差异表达的9条miRNAs(miR.31、miR.93、miR一100、miR一152、miR.497、miR.122、miR一192、miR-194和miR-200b),进行RT-qPCR验证。结果显示:与空白对照组比较或与生理盐
7、水组比较,miR-31、miR.93、温州医学院硕士学位论文miR.100、miR-152、miR.497、miR-192、miR.194和miR一200b等8条miRNAs在高糖组大鼠腹膜组织中的表达均呈显著性低表达(P值均<0.05),miR-122在高糖组大鼠腹膜组织中呈显著性高表达(P<0.05);生理盐水组与空白对照组的组间比较,上述9条miRNAs在大鼠腹膜组织中的表达均无显著差异(P值均>O.05)。结论:(1)4.25%葡萄糖腹膜透析液,连续腹腔注射28天,可以建立大鼠PF模型。(2)miR.31、miR.93、miR.1
8、00、miR-152、miR-497、miR一122、miR-192、miR-194和miR一200b等多条miRNAs可能参与高浓度葡萄糖腹膜透析液诱导的大鼠腹膜纤维化。关键词:腹膜纤维化;
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