炎症对不同组织细胞脂质代谢和fatcd36表达影响的研究

《炎症对不同组织细胞脂质代谢和fatcd36表达影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、重庆医科大学硕士学位论文炎症对不同组织细胞脂质代谢和FAT/CD36表达影响的研究姓名：万克强申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：阮雄中201205重庆医科大学硕士研究生学位论文炎症对不同组织细胞脂质代谢和FAT／CD36表达影响的研究摘要第一部分炎症对小鼠脂质代谢的影响目的：脂质代谢紊乱是指先天性或后天获得性因素引起血液和组织器官中的脂质及其相关代谢产物的质或量的异常。在脂质介导的器官损害的机制研究中，有研究者认为胰岛素抵抗是其主要因素，而近来更多的人认为慢性炎症是脂质介导的器官损害的中心环节。这种炎症不同于产生“红肿热痛”的一般性炎症，是低丰度系统性慢性炎症，能够在机体

2、与脂质共同作用，在许多分子信号通路参与下引起多种器官的病理损害及脂质代谢相关疾病的发生。本实验通过10％的酪蛋白连续14周皮下注射C57BL／6J小鼠建立慢性炎症小鼠模型，来模拟人体的低丰度系统性慢性炎症状态。通过此炎症模型，观察小鼠血液和组织内脂质含量与分布。方法：从重庆医科大学实验动物中心领取53只八周龄的C57BL／6J雄性小鼠，按饮食喂养和处理方式的不同随机分为四种：普通饮食组(n=12，NCD)，高胆固醇饮食组(n=12，HCD)，普通饮食+炎症组(n=14，NCD+Casein)和高胆固醇饮食+炎症组(n=15，HCD+Casein)。其中高胆固醇饮食含有1．25％

3、胆固醇、0．5％胆酸盐和21％脂肪，炎症组的小鼠隔日皮下注射O．5mL的lO％的酪蛋白，非炎症组的小鼠隔日注4重庆医科大学硕士研究生学位论文射等量的生理盐水，连续注射14周后处死小鼠，收集小鼠血浆、骨骼肌、脂肪、肾脏等组织，将血浆离心后取上层血清，通过ELISA测定各只小鼠血清的炎症因子SAA和IL．6含量。ELISA法测定小鼠血清FFA含量，而小鼠的骨骼肌、脂肪、肾脏等组织用于制作冰冻切片和石蜡切片标本。将骨骼肌、脂肪、肾脏组织的冰冻切片标本进行油红O染色，称取0．19组织提取TG和FFA，检测经过炎症干预后的小鼠骨骼肌、脂肪、肾脏组织的脂质水平。结果：(1)无论是在普通饮食

4、还是高胆固醇饮食下，Casein注射的小鼠血清SAA和IL．6水平均显著升高，P<0．05，差异有统计学意义。(2)通过血清FFA水平测定，与NCD组小鼠比较，NCD+Casein组和HCD组小鼠血清FFA均明显增加，差异有统计学意义，P<0．05；与HCD组的小鼠比较，HCD+Casein组小鼠血清FFA明显增加，差异有统计学意义，P<0．05。(3)各组标本进行油红0染色及TG和FFA测定，与NCD组小鼠比较，HCD组小鼠三种组织脂质积聚增加；与HCD组小鼠比较，HCD+Casein组小鼠的骨骼肌和肾脏组织脂质异常积聚，脂肪组织的脂质无影响。结论：皮下注射10％酪蛋白，成功

5、构建小鼠炎症模型，能够很好模拟人体的低丰度系统性慢性炎症状态。研究表明，当一种T淋巴细胞在肥胖患者内脏脂肪聚集时，可能会形成脂肪炎症，进而引起代谢综合征的发生。通过小鼠炎症模型检测发现小鼠体内发生了脂质代谢紊乱，小鼠血清FFA明显增加，骨骼肌和肾脏组织脂质增多，而脂肪组织脂质增加不明显。分析组织间脂质分布的差异主要原因是：脂肪组气重庆医科大学硕士研究生学位论文织是慢性炎症反应的靶器官和来源，炎症介导脂质的积聚首先发生在脂肪组织，而脂肪组织作为脂肪的储存器官，能够代偿性的进行脂质代谢与分布。有研究报道，低丰度系统性慢性炎症促进脂肪在白色脂肪组织内的分解及在其他组织的沉积，代谢性炎

6、症引起脂肪重分布这一重要机制参与多种代谢性相关疾病的发生发展，其中涉及的分子信号通路仍不明了。在炎症状态下，某种膜蛋白是否在机体表达，能够跨膜转运脂肪组织中的脂质至其他组织，使组织的脂质重分布?关键词：炎症模型，酪蛋白，脂质代谢第二部分炎症对不同组织FAT／CD36表达的影响目的：炎症介导各种组织脂质代谢紊乱的分子信号通路众多，有研究者在炎症模型小鼠中同样观察到脂质在组织间的异位沉积，认为炎症刺激非脂肪组织的生脂基因固醇调节元件结合蛋白1及其下游靶点表达增加，而脂肪组织生脂关键基因的表达减少，脂肪相关分解酶表达增加。此观点不能很好阐述整个机体对炎症刺激的反应特点，也不能解释各个

7、组织器官间相互作用的机理。脂质代谢紊乱过程早期有血液游离脂肪酸的增加，研究游离脂肪酸相关的代谢酶尤为重要，脂肪酸转运酶(FAT)／CD36作为脂肪酸重要代谢酶之一，在各种组织细胞有广泛的分布，检测FAT／CD36表达能更好观察机体对炎症反应的分子调节过程。本实验通过炎症模型，检测小鼠肌肉、脂肪和肾脏组织的FAT／CD36表达。方法：将小鼠骨骼肌、脂肪、肾脏组织的石蜡切片取出，按照免6重庆医科大学硕士研究生学位论文疫组化染色方法观察各个组的FAT／CD36蛋白的表达情况。称取O．19肌肉、脂肪